JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 3:57 min. • April 30th, 2023
- Limfocyty T, klasa limfocytów, odgrywają aktywną rolę w zwalczaniu infekcji. Wraz z wieloma innymi typami krwinek, immunokompetentne limfocyty T są obecne w śledzionie i węzłach chłonnych myszy. Aby selektywnie wyizolować limfocyty T, należy pobrać mysią śledzionę i węzły chłonne, a następnie zmacerować je na sitku do komórek. Przepłukać tkankę odpowiednim podłożem, aby uzyskać zawiesinę pojedynczej komórki.
Dodaj chlorek amonu potasu lub bufor ACK, aby zlizować czerwone krwinki. Odwirować w celu oddzielenia nienaruszonych krwinek od lizatu. Odrzucić supernatant i ponownie zawiesić komórki w odpowiednim buforze. Zawiesinę należy potraktować mieszaniną biotynylowanych przeciwciał mysich do docelowych komórek krwi, takich jak granulocyty, limfocyty B, komórki NK i wszelkie pozostałe erytrocyty. Limfocyty T nie są celem i dlatego pozostają nieoznakowane.
Następnie dodaj do zawiesiny mikrokulki magnetyczne antybiotyny. Wszystkie komórki znakowane biotyną wiążą się z mikrogranulkami. Pod wpływem silnego pola magnetycznego magnetycznie znakowane komórki przylegają do ścianki rury. Nieznakowane limfocyty T pozostają w zawiesinie. Zbierz niezwiązane, wzbogacone limfocyty T do świeżej pro
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych