JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 4:59 min. • April 30th, 2023
- Retrowirusy to wirusy RNA, które replikują się przy użyciu odwrotnej transkryptazy do przekształcania swojego genomu RNA w dwuniciowe DNA i trwale integrują się z genomem gospodarza. Nowe cząsteczki wirusa opuszczają komórkę i mogą infekować inne komórki. Terapia genowa nowotworów wykorzystuje wektory retrowirusowe do wprowadzania genów terapeutycznych do komórek docelowych za pomocą techniki zwanej transdukcją w celu obniżenia zmutowanego genu lub wyeliminowania komórek.
Aby uzyskać wektory retrowirusowe o wysokim mianie, należy przetransfekować komórki HEK 293 mieszaniną transfekcyjną zawierającą pożądany plazmid retrowirusowy, plazmid opakowaniowy i odpowiedni środek transfekcyjny. Inkubuj komórki. Środek transfekujący ułatwia dostarczanie obu plazmidów do komórek.
Plazmid retrowirusowy koduje genom wirusa za pomocą genu docelowego, podczas gdy plazmid pakujący koduje białka otoczki wirusa. Maszyneria komórkowa komórek pakujących tworzy cząstki retrowirusowe i uwalnia je do pożywki. Zebrać supernatant wirusa i odwirować w celu usunięcia komórek.
Przenieś pożądane stężenie cząstek wirusa i komórek rakowych na płytkę hodowlaną pokrytą fibronektyną, aby ułatwić wiązanie białek ot
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych