Ortotopowy przeszczep guza homograftu: technika generowania mysich modeli guza trzustki

- Podczas ortotopowego przeszczepu homograftu guza komórki nowotworowe lub fragmenty guza od dawcy nowotworowego są przeszczepiane biorcy należącemu do tego samego gatunku w narządzie lub miejscu pasującym do histotypu guza. Zacznij od pobrania znieczulonej myszy dawcy z guzem, zawierającym komórki pochodzenia trzustkowego. Wysterylizuj obszar i chirurgicznie zbierz guz. Umyj chusteczkę, aby usunąć krew i posiekaj ją na fragmenty. Następnie umieść znieczuloną mysz biorcę w prawej pozycji bocznej i wysterylizuj jej okolicę brzucha. Chirurgicznie odsłonić śledzionę.

Następnie delikatnie wyciągnij część trzustki spod śledziony. Umieść fragment guza na trzustce i zszyj je razem. Zamknij brzuch i pozwól myszy dojść do siebie w klatce. Codziennie monitoruj mysz biorcy, aby obserwować wzrost ortotopowego guza trzustki. W poniższym protokole pokażemy ortotopowe przeszczepienie homograftu gruczolakoraka przewodowego trzustki od myszy dawcy C57 black 6 do trzustki myszy biorcy C57 black 6.

- Monitoruj masę ciała myszy C57 black 6 za pomocą wagi. Monitoruj również objętość guza myszy dawców z guzem za pomocą pomiaru suwmiarki. Po eutanazji zwierzęcia w kapturze zagrożenia biologicznego zgodnie z protokołem, wysterylizuj skórę wokół guza za pomocą wacików jodoforowych. Po chirurgicznym usunięciu guza, jak opisano w protokole tekstowym, umieść guz na szalce Petriego zawierającej 20 mililitrów PBS, która została wstępnie schłodzona do czterech stopni Celsjusza. Jeśli krew jest zanieczyszczająca, przenieś guz na inną szalkę Petriego i umyj guz PBS.

Przetnij guz na pół. Usuń nadmiar skóry, naczyń, zwapnienia i/lub martwicę. Wybierz tylko nienaruszone kawałki guza i umieść je w sterylnej 50-mililitrowej probówce wirówkowej. Dodaj 20 mililitrów PBS przed przetransportowaniem probówki do oddzielnego pomieszczenia dla zwierząt w celu badań farmakologicznych. Aby przygotować się do implantacji ortotopowej, zamocuj w pełni znieczuloną mysz na tablicy eksperymentalnej w odpowiedniej pozycji bocznej. Zdezynfekuj skórę wokół śledziony jodem, a następnie odjodyniuj 75% alkoholem etylowym.

Znajdź środkowy punkt śledziony i wykonaj jednocentymetrowe pionowe nacięcie na brzuchu, aby odsłonić śledzionę. Delikatnie wyciągnij część tkanki trzustki pod śledzioną za pomocą pęsety z płaską końcówką i zszyj fragment guza homoprzeszczepu myszy z myszy nasiennej na trzustkę myszy biorcy za pomocą wchłanialnego szwu chirurgicznego 9-0. Zamknij brzuch jedwabnym szwem 6-0 podwójnym szwem. Osiągnij homeostazę przez kompresję.

Po zakończeniu implantacji guza trzymaj zwierzęta w ciepłej klatce, o ile nie wystąpi krwawienie lub wyciek tkanki nowotworowej. Monitorować zwierzę, dopóki nie odzyska wystarczającej przytomności, aby utrzymać pozycję leżącą mostka. Zwróć zwierzę do pomieszczenia dla zwierząt po pełnym wyzdrowieniu ze znieczulenia. Monitoruj myszy z guzem, badając palpacyjnie brzuch w pobliżu śledziony i wybierz myszy z guzami ortotopowymi.

• Orthotopic Homograft Transplantation - Procedure of transplanting tumor cells from a donor to a same species recipient at a corresponding organ.
• Pancreatic Cancer Homograft Models - Scientific models used for studying pancreatic cancer by transplanting tumor homografts.
• Orthotopic - Refers to the transplantation of cells or tissues into their natural site of occurrence in the body.
• Tumor Homograft Models - Research models involving the transplantation of tumor tissues between same-species subjects.
• Mouse Cancer Models - Laboratory mice bred or genetically engineered for use in cancer research.

• Introduce Orthotopic Homograft Transplantation – This procedure involves transplanting tumor cells from a donor to a same species recipient (e.g., mouse tumor).
• Key Concepts – Pancreatic Cancer Homograft Models allow us to study pancreas cancer progression (e.g., tumor mouse models).
• Underlying Mechanisms – Transplantation is done at matching organ site for accurate reflection of cancer progression.
• Connect to Experiment – The procedure mentioned is used to establish a mouse model for studying pancreatic cancer progress.

• Practical Applications – Allows for accurate representation of cancer progression enhancing research (e.g., tumor mouse model).
• Industry Impact – Impact on medical and biotechnological sectors (e.g., healthcare).
• Societal Importance – Enhances understanding of cancer which could lead to better treatments (e.g., health).
• Link to Scientific Advancements – Establishes a platform for scientific research and innovations in cancer treatment.