Trawienie enzymatyczne nowotworu: procedura generowania zawiesiny komórek nowotworowych z mysich modeli ksenoprzeszczepu pochodzących od pacjenta
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 3:56 min. • April 30th, 2023
- Modele ksenoprzeszczepu pochodzącego od pacjenta lub PDX to eksperymentalne modele zwierzęce zawierające komórki nowotworowe lub fragmenty guza wszczepione bezpośrednio od ludzkiego pacjenta. Modele te symulują mikrośrodowisko ludzkiej tkanki nowotworowej, umożliwiając propagację guza. Aby wygenerować zawiesiny komórek nowotworowych, najpierw zbierz część guza pochodzącą od pacjenta od myszy biorcy.
Zmiel segmenty guza, aby uzyskać mniejsze fragmenty. Potraktuj fragmenty roztworem trawiącym zawierającym koktajl kolagenazy, hialuronidazy i enzymów dezoksyrybonukleazy. Kolagenaza i enzymy hialuronidazy trawią macierz zewnątrzkomórkową, która utrzymuje tkankę razem, ułatwiając uwalnianie poszczególnych komórek do zawiesiny.
Deoksyrybonukleaza degraduje wolne DNA uwolnione z komórek poddanych lizie. Teraz przefiltruj strawioną próbkę przez sitka komórkowe, aby usunąć wszelkie niestrawione tkanki i zanieczyszczenia oraz uzyskać zawiesiny jednokomórkowe. Odwirować, aby oddzielić komórki. Odrzucić sklarowany osad zawierający mieszaninę wytrawiającą i ponownie zawiesić osad komórkowy w świeżej pożywce.
Na koniec uzupełnij komórkami zrębu węzłów chłonnych w pożądanym stosunku, aby zwiększ
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych