Model resekcji jelita krętego u myszy: badanie metabolizmu żółci wywołanego ileektomią w modelu mysim
JoVE Encyclopedia of Experiments
Badania nad rakiem
0 wyświetleń • 4:35 min • April 30th, 2023
- Krążenie jelitowo-wątrobowe kwasów żółciowych, czyli BA, utrzymuje homeostazę w organizmie. Komórki wątroby lub hepatocyty wytwarzają BA, skąd przemieszczają się w kierunku jelita krętego i są aktywnie transportowane wewnątrz komórek jelitowych lub ileocytów. Wewnątrz ileocytów BA aktywują syntezę hormonu czynnika wzrostu fibroblastów lub FGF. FGF jest transponowany z powrotem do wątroby przez żyłę wrotną wątroby i wiąże receptory na hepatocytach, wysyłając w ten sposób dalszy sygnał ujemnego sprzężenia zwrotnego w celu wyłączenia produkcji BA.
Resekcja jelita krętego jest powszechną strategią leczenia raka jelita grubego. Dlatego przygotowujemy mysi model resekcji jelita krętego, aby uzyskać wgląd w rolę jelita krętego w raku jelita grubego.
Zacznij od umieszczenia znieczulonej myszy na desce sekcyjnej i wykonaj nacięcie brzucha w linii środkowej. Następnie należy odsłonić jelito kręte i wyciąć wybrany odcinek jelita krętego i zszyć końce jelita krętego razem. Na koniec należy przywrócić jelito zespoleniowe w jamie brzusznej i zszyć nacięty mięsień i warstwę skóry.
Pozwól myszy dojść do siebie i przeanalizować skutki usunięcia jelita krętego, które może powodować nadmierną akumulację żółci w jelitach. W poniższym protokole przygotujemy mysi model resekcji jelita krętego w celu zbadania wpływu hormonu FGF jelita krętego na metabolizm żółci.
- Zacznij od potwierdzenia odpowiedniego poziomu sedacji poprzez uszczypnięcie palca u nogi i nałożenie kremu do depilacji na brzuch myszy. Usuń sierść za pomocą gąbek chirurgicznych i umieść zwierzę na stole chirurgicznym dla małych zwierząt o kontrolowanej temperaturze, ustawionym na 37 stopni Celsjusza. Nałóż maść na oczy zwierzęcia i zdezynfekuj odsłoniętą skórę sekwencyjnym peelingiem powidonowo-jodowym i 70% etanolowym.
Przykryj obszar chirurgiczny brzucha sterylną gazą chirurgiczną i za pomocą skalpela wykonaj nacięcie w linii środkowej brzucha i przetnij warstwę mięśniową. Używając aplikatora z bawełnianą końcówką w celu ochrony jelit, całkowicie otwórz mięśnie brzucha myszy za pomocą retraktorów, aby odsłonić jamę brzuszną.
Zaczynając od jelita ślepego, ostrożnie przesuń połączone jelito kręte i część jelita czczego z jamy brzusznej i użyj jedwabnego szwu 7-0, aby podwiązać górną gałąź tętnicy krezkowej górnej. Gdy kolor tkanki zmieni się z różowego na ciemny, wskazując na pełną okluzję, użyj nożyczek, aby wyciąć 50% lub 90% jelita krętego, w zależności od parametrów eksperymentu.
Przepłucz światło obu końców jelita krętego 0,9% soli fizjologicznej. Po zlokalizowaniu krezki po stronie obu końców jelita krętego, wyrównaj krezki na obu końcach wyciętej tkanki i użyj 8-0 szew, aby połączyć końce ze sobą. Zszyj przeciwległą stronę jelita krętego, aby utrzymać zespolenie jelita krętego w naturalny sposób i zszyj górną i dolną stronę między dwoma oryginalnymi szwami, aby dokładnie połączyć dwa końce jelita krętego.
Po stwierdzeniu braku wycieku z miejsca zespolenia należy przywrócić jelito ślepe i jelito cienkie do ich pierwotnych lokalizacji anatomicznych i igłą przemyć obszar operowany ciepłą solą fizjologiczną o stężeniu 0,9%. Zamknij warstwę mięśni brzucha szwem 6-0 i wyrównaj nacięcie skóry brzucha, aby zamknąć skórę i ułatwić optymalne gojenie się ran.
Następnie przenieś mysz na oddział intensywnej terapii w klatce z papierowej ściółki na poduszce grzewczej o kontrolowanej temperaturze, aby zapewnić sobie nocną regenerację z miękkim jedzeniem oprócz zwykłego jedzenia i wody.
Przegląd
Niniejsze badanie analizuje krążenie jelitowo-wątrobowe kwasów żółciowych oraz jego rolę w raku jelita grubego z wykorzystaniem mysiego modelu resekcji jelita krętego. Badania koncentrują się na wpływie usunięcia jelita krętego na metabolizm kwasów żółciowych oraz syntezę czynnika wzrostu fibroblastów (FGF).
Kluczowe elementy badania
Dziedzina nauki
- Neuronauka
- Biologia
- Gastroenterologia
Wprowadzenie
- Krążenie jelitowo-wątrobowe ma kluczowe znaczenie dla homeostazy kwasów żółciowych.
- FGF odgrywa istotną rolę w regulacji produkcji kwasów żółciowych.
- Rezekcja jelita krętego jest powszechną metodą leczenia raka jelita grubego.
- Zrozumienie roli jelita krętego może dostarczyć cennych informacji na temat metabolizmu kwasów żółciowych.
Cel badania
- Przygotowanie mysiego modelu resekcji jelita krętego.
- Analiza wpływu usunięcia jelita krętego na akumulację kwasów żółciowych.
- Badanie roli FGF w metabolizmie kwasów żółciowych po resekcji.
Zastosowane metody
- Znieczulenie myszy i przygotowanie pola operacyjnego.
- Wykonanie cięcia w linii pośrodkowej brzucha w celu uzyskania dostępu do jelita krętego.
- Resekcja segmentu jelita krętego i zszycie końców.
- Monitorowanie rekonwalescencji oraz analiza efektów metabolicznych po operacji.
Główne wyniki
- W modelu mysim pomyślnie przeprowadzono resekcję jelita krętego.
- Analiza pooperacyjna wykazała nadmierne gromadzenie się żółci.
- Poziomy FGF uległy zmianie w wyniku usunięcia jelita krętego.
- Model ten pozwolił na uzyskanie nowych informacji na temat metabolizmu żółci.
Wnioski
- Myszii model resekcji jelita krętego jest skuteczny w badaniu metabolizmu kwasów żółciowych.
- FGF odgrywa kluczową rolę w regulacji zwrotnej kwasów żółciowych.
- Dalsze badania są niezbędne, aby zgłębić potencjalne zastosowania terapeutyczne w raku jelita grubego.
Najczęściej zadawane pytania
Znaczenie dla Przemysłu
Zrozumienie wpływu resekcji jelita krętego na metabolizm kwasów żółciowych dostarcza wglądu w mechanizmy istotne dla toksyczności żołądkowo-jelitowej oraz strategii terapeutycznych w raku jelita grubego. Ten model mysi umożliwia przedkliniczną ocenę nadmiernej akumulacji żółci oraz zaburzeń sygnalizacji FGF, co wspiera walidację celów w modulacji szlaku jelitowo-wątrobowego. Podejście to pomaga w weryfikacji hipotez łączących resekcję jelit z dysregulacją metaboliczną w kontekście onkologicznym.
Zastosowania strategiczne w badaniach i rozwoju biofarmaceutycznym
Wczesne odkrywanie i walidacja celu
- Wartość naukowa: Analiza roli jelita krętego w homeostazie kwasów żółciowych i regulacji sprzężenia zwrotnego za pośrednictwem FGF.
- Wartość operacyjna: Umożliwia funkcjonalną walidację celów jelitowych zaangażowanych w transport i metabolizm żółci.
- Wartość predykcyjna: Wspiera ocenę efektów modulacji celów w odniesieniu do nadmiernej akumulacji kwasów żółciowych i toksyczności nabłonkowej.
Przesiewy i opracowywanie testów
- Gotowość do analizy: Generuje modele tkanek istotne dla danej choroby w celu ilościowego oznaczania poziomu kwasów żółciowych oraz uszkodzeń jelit.
- Wynik ilościowy: Umożliwia pomiar nadmiernej akumulacji żółci jako odczytu farmakodynamicznego.
- Powtarzalność: Standaryzowana procedura chirurgiczna zapewnia spójne generowanie modeli w różnych badaniach.
Badania translacyjne i przedkliniczne
- Znaczenie dla jednostki chorobowej: Modeluje zaburzenia wchłaniania żółci wywołane ilektomią, obserwowane u pacjentów po operacjach chirurgii gastroduodenalnej.
- Ciągłość translacyjna: Łączy zaburzenia sygnalizacji FGF ze zmianami w metabolizmie żółci w jelitach myszy.
- Ocena ryzyka: Dostarcza informacji na temat mechanistycznego rozumienia toksyczności jelitowej następującej po resekcji.
- Użyteczność przedkliniczna: Wspiera ocenę interwencji ukierunkowanych na homeostazę kwasów żółciowych lub szlaki FGF.
Integracja potoku i przepływu pracy
Model ten integruje się z procesami badawczymi, zapewniając biologicznie istotny system do badania skutków resekcji jelita w kontekście sygnalizacji metabolicznej, w szczególności w ramach opieki wspomagającej w onkologii oraz oceny bezpieczeństwa gastrycznego.
- Biologia odkrywcza: Testuje hipotezy dotyczące syntezy FGF w jelicie krętym oraz jej roli w wątrobowym sprzężeniu zwrotnym w regulacji kwasów żółciowych.
- Analityka: Umożliwia kwantyfikację akumulacji kwasów żółciowych oraz ocenę histologii jelit jako kluczowych punktów końcowych metabolizmu.
- Badania translacyjne: Łączy resekcję jelita krętego u myszy z zaburzeniami metabolizmu kwasów żółciowych u ludzi po operacjach chirurgicznych.
- Zastosowanie w przedsiębiorstwie: Ustanawia powtarzalny model chirurgiczny do badania skutków usunięcia odcinków jelita w różnych obszarach terapeutycznych.
Wpływ operacyjny i przedsiębiorczy
- Wartość naukowa: Dostarcza wglądu w mechanizmy dysregulacji kwasów żółciowych i utraty sygnalizacji FGF po resekcji.
- Wartość operacyjna: Zapewnia zestandaryzowany, powtarzalny model do badań nad resekcją jelit.
- Wartość strategiczna: Wspiera decyzje dotyczące kontynuacji lub przerwania badań (go/no-go) poprzez ujawnienie metabolicznych skutków w jelitach związanych z celem terapeutycznym.
- Wpływ na portfolio: Wspiera postępy skorygowane o ryzyko dzięki wczesnej identyfikacji mechanizmów toksyczności zapośredniczonej przez kwasy żółciowe.
Wskazówki dotyczące wdrożenia
- Wymaga doświadczenia w zakresie mysich technik chirurgicznych oraz anastomozy jelita.
- Zależne od sterylnej infrastruktury chirurgicznej i możliwości monitorowania pooperacyjnego.
- Wymaga znormalizowanych protokołów dotyczących zakresu resekcji jelita krętego oraz obchodzenia się z tkanką.
- Wiąże się z koordynacją międzyzespołową w zakresie chirurgii, metabolizmu i histologii.
- Ograniczone do fizjologii myszy; należy uwzględnić różnice międzygatunkowe w kinetyce kwasów żółciowych.
Najczęściej zadawane pytania dotyczące biofarmacji
Wykorzystanie wielofluorowanych kwasów żółciowych i rezonansu magnetycznego in vivo do pomiaru transportu kwasów żółciowych
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Analizy histologiczne ostrego alkoholowego uszkodzenia wątroby u danio pręgowanego
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Onkogenny, indukowany hepatocytami, ortotopowy mysi model raka wątrobowokomórkowego powstającego w warunkach zapalenia i zwłóknienia wątroby
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Model pętli jelita krętego myszy: model chirurgiczny do badania przepuszczalności jelit u myszy
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Mysia resekcja jelita krętniczo-okrężniczego z zespoleniem pierwotnym
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Mysi model uszkodzenia niedokrwienno-reperfuzyjnego jelit
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Nadmierna akumulacja żółci wywołana ileektomią w jelicie myszy
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Mysi model częściowej niedrożności jelit
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Mysia kolostomia dystalna, nowy model dywersyjnego zapalenia jelita grubego u myszy C57BL / 6
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Mysi model wycięcia wyrostka robaczkowego przewlekłego raka jelita grubego związanego z zapaleniem jelita grubego poprzez precyzyjną lokalizację łaty kątniczej
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Ostatnia aktualizacja: 22 sierpnia 2026