Name: Technika zbierania brodawek grzybowych (smakowych) z ludzkiego języka (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2010-09-18T17:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 39 s
Description: Poznaj technikę pobierania brodawek grzybowych z języka człowieka w celu badań molekularnych i histologicznych smaku. Ta metoda umożliwia uzyskanie żywych tkanek smakowych do analizy mechanizmów percepcji smaku u ludzi.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Praca ta była wspierana przez NIH R21 DC03969-01 (dla JGB). Dziękujemy dr. Fritzowi Lischce za wyizolowanie pojedynczych komórek pączków smakowych, dr. Tauf Huque za przeprowadzenie RT-PCR przedstawionego na rysunku 4B oraz panu D. Bayleyowi i pani S. Alarcon za pomoc techniczną. M. Yanina Pepino jest stypendystką wspieraną przez NIDAT32 DA07313 Washington University School of Medicine, St. Louis, MO (Cottler, L.B. PI).

<ol><li>Breslin, P. A., Spector, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mammalian+taste+perception%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Mammalian taste perception.</a> Curr Biol. 26 (4), R148-R155 (2008).</li>
<li>Miller, I. Anatomy of the peripheral taste system. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMiller%2C+I+%22Handbook+of+Olfaction+and+Gustation%22">Handbook of Olfaction and Gustation</a>. Doty, R. I., Dekker, M. , Marcel Dekker. New York. 521-547 (1995).</li>
<li>Figure 12.67. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Gray%27s+Anatomy%3A+The+Anatomical+Basis+of+Medicine+and+Surgery%22">Gray's Anatomy: The Anatomical Basis of Medicine and Surgery</a>. , 38th Edition, Churchill Livingstone. New York. (1995).</li>
<li>Huque, T., Cowart, B. J., Dankulich-Nagrudny, L., Pribitkin, E. A., Bayley, D. L., Spielman, A., Feldman, I., S, R., Mackler, <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sour+ageusia+in+two+individuals+implicates+ion+channels+of+the+ASIC+and+PKD+families+in+human+sour+taste+perception+at+the+anterior+tongue%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Sour ageusia in two individuals implicates ion channels of the ASIC and PKD families in human sour taste perception at the anterior tongue.</a> PLoS One. 4 (10), e7347-e7347 (2009).</li>
<li>MacDonald, J. F., Mody, I., Salter, M. W., Spielman, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Patch-clamping+of+taste+cells+in+mouse%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+Cell+Biology+of+Taste+and+Olfaction%22%5BJournal%5D)">Patch-clamping of taste cells in mouse.</a> Experimental Cell Biology of Taste and Olfaction. Spielman, A. I., Brand, J. G. , CRC Press. Boca Raton, FL. 329-332 (1995).</li>
</ol>

Brak zadeklarowanych konfliktów interesów.

Istotną zaletą wykorzystania ludzkich komórek jest ich specyficzność. Opisana tutaj szczegółowo procedura pozwala na pozyskanie tkanki języka w celu izolacji komórek receptorowych smaku u ludzi. Komórki smakowe te mogą być wykorzystywane w badaniach molekularnych, mających na celu odkrycie cząsteczek ważnych dla transdukcji informacji smakowej, a także w badaniach obrazowania wapnia, które monitorują aktywność komórek smakowych w odpowiedzi na bodźce. Dodatkowo, tkanka języka pozyskana za pomocą tej procedury może być an...

<table><tbody><tr><td>McPherson-Vannas. Zakrzywiona, ostra krawędź tnąca 5mm. Grzebień, szerokość końcówki 0,2 mm, całkowita długość 3&quot;</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-5603, Roboz</td><td></td></tr><tr><td>Mała pęseta Dumonta</td><td>Roboz Surgical Instruments Co.</td><td>RS-4915, Roboz</td><td></td></tr></tbody></table>

technika pobierania brodawek grzybiastych (smakowych) z ludzkiego języka

Technique to Collect Fungiform (Taste) Papillae from Human Tongue

Zmysł smaku ma kluczowe znaczenie dla życia człowieka. Informuje on organizm o jakości pokarmu, który zostanie potencjalnie spożyty, i stymuluje procesy metaboliczne przygotowujące kanał pokarmowy do trawienia. Odnotowuje się stały postęp w zrozumieniu wczesnych zdarzeń biochemicznych i molekularnych leżących u podstaw transdukcji smaku (przegląd: Breslin i Spector, 20081). Jednak dotychczasowe postępy wynikały w dużej mierze z zastosowania modeli zwierzęcych. Ponieważ jednak wystnieją wyraźne różnice w specyficzności i gęstości receptorów między gatunkami, transdukcję smaku u ludzi można zrozumieć jedynie przy użyciu ludzkiej tkanki smakowej. W niniejszej pracy opisujemy technikę biopsji służącą do pobierania ludzkich brodawek nitkowatych, widocznych jako zaokrąglone, różowe struktury przednie o średnicy około 0.5 mm, zawierające pąki smakowe. Pobrane w ten sposób brodawki są wykorzystywane do wielu celów, w tym do izolacji żywych komórek pąków smakowych, hybrydyzacji in situ, immunohistochemii oraz – za pomocą technik biologii molekularnej – do identyfikacji nowych białek swoistych dla smaku.

Wiedza na temat mechanizmów molekularnych leżących u podstaw transdukcji smaku poczyniła ostatnio znaczne postępy, głównie dzięki wykorzystaniu modeli zwierzęcych. Jednakże szeroka rozpiętość czułości i specyficzności smakowej wśród ssaków uzasadnia prowadzenie badań na tkankach ludzkich. Opisujemy technikę biopsji służącą do pobierania żywych komórek smakowych z brodawek języka człowieka.

Technika pobierania brodawek grzybiastych (smakowych) z ludzkiego języka

Zmysł smaku ma kluczowe znaczenie dla życia człowieka. Informuje on organizm o jakości pokarmu, który może zostać spożyty, oraz stymuluje procesy metaboliczne...

Ogólnym celem tej procedury jest usunięcie grzybów ludzkich z per pilly. Osiąga się to poprzez owinięcie sterylnego gazika Gores wokół przedniej ćwiartki języka i mocne przytrzymanie go lewą ręką. Delikatnie pchnij lewy palec wskazujący od spodu języka tak, aby język został na nim rozciągnięty, odsłaniając docelowe formy grzybów per pill.Drugim krokiem procedury jest wstrzyknięcie 0,25 milliliters 2% lidokainy w obszar grzbietowy języka, dystalnie w stosunku do miejsca pobrania. Należy odczekać trzy minuty, aż znieczulenie zacznie działać. Trzecim krokiem procedury jest usunięcie brodawki; wycięcie wykonuje się najwewnętrznym segmentem ostrzy, blisko rozwidlenia.Ustaw otwarte ostrza nożyczek nad docelowym filarkiem, jednocześnie dociskając otaczającą tkankę tak, aby docelowa brodawka wysunęła się pomiędzy ostrza, a następnie wykonaj cięcie jednym szybkim ruchem. Unikaj używania końcówek nożyczek do cięcia. Ostatnim etapem procedury jest uniesienie wyciętego filarka za pomocą ostrzy nożyczek oraz pęsety anatomicznej.Ostrożnie przenieś wycięty filarek do odpowiedniego buforu. Unikaj przyciśnięcia filarka. Preparat można wykorzystać do hybrydyzacji in situ, immunohistochemii, reakcji

technique-to-collect-fungiform-taste-papillae-from-human-tongue

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Technika pobierania brodawkowatych brodawek smakowych z ludzkiego języka

Naszym celem było opracowanie powtarzalnego protokołu izolacji i długoterminnego utrzymywania kultur komórek ludzkich brodawek smakowych grzybiastych. Komórki z ludzkich brodawek grzybiastych uzyskane drogą biopsji zostały pomyślnie utrzymane w kulturze przez ponad osiem pasażów (12 miesięcy) bez utraty żywotności.

Izolacja i hodowla komórek ludzkich brodawek smakowych grzybiastych

W tym filmie opisujemy izolację nabłonka brodawek okołokolacyjnych (CVP) od mysiego języka.

Izolacja nabłonka brodawek obwodowych (CVP) z modelu mysiego: procedura enzymatyczna mająca na celu oddzielenie nabłonka CVP od języka myszy

Doustna chemorecepcja kwasów tłuszczowych i związek z dietą i preferencjami dotyczącymi tłustych potraw może umożliwić identyfikację mechanizmów związanych z rozwojem otyłości i dlaczego zmiany w diecie mogą być trudne dla wielu osób.

Pomiar doustnych progów kwasów tłuszczowych, percepcji tłuszczu, upodobania do tłustych potraw i gęstości brodawek u ludzi

Tutaj prezentujemy protokół do pomiaru gęstości brodawek grzybowych na podstawie zdjęć cyfrowych. Metoda ta włącza priorytetyzację i obiektywne wskaźniki charakterystyki do oryginalnej pracy opisowej na temat brodawek grzybowatych autorstwa Millera i Reedy'ego (1990).

Protokół Denver Papillae do obiektywnej analizy brodawek grzybiczych

Ten protokół mierzy ludzkie reakcje smakowe i obejmuje krótką ocenę anatomiczną, krótki test smaku oraz metodę walidacji przy użyciu zgłoszonego przez badanego genotypu odczucia i receptora smaku.

Egzamin smakowy: krótki i zatwierdzony test

Ten artykuł opisuje metody przygotowania tkanek, barwienia i analizy całych grzybów, obwodowych i podniebiennych kubków smakowych, które konsekwentnie dają całe i nienaruszone kubki smakowe (w tym włókna nerwowe, które je unerwiają) i utrzymują relacje między strukturami wewnątrz kubków smakowych a otaczającą je brodawką.

Barwienie całego wierzchu, wizualizacja i analiza grzybokształtnych, obwodowych i podniebienia kubków smakowych

Artykuł przedstawia urządzenie μTongue (mikrofluidyka na języku) do funkcjonalnego obrazowania komórek smaku in vivo poprzez integrację mikrofluidyki z okienkiem obrazowania przyżyciowego na języku.

μTongue: oparta na mikrofluidyce funkcjonalna platforma obrazowania języka in vivo

Dostępność wysepek trzustkowych od osób z cukrzycą typu 2 do celów badawczych jest niewystarczająca. Przedstawiamy tutaj nasz protokół izolacji wysepek od pacjentów poddawanych częściowej pankreatektomii. Podejście to stanowi unikalną możliwość pozyskania wysepek od osób z cukrzycą typu 2 oraz klinicznie dopasowanych osób niediabetycznych w liczbie odpowiedniej do badań podstawowych i klinicznych.

Izolacja wysepek trzustkowych człowieka od pacjentów po częściowej pankreatektomii

W pracy opisano uproszczoną technikę wycinania rogówki oraz ewizceracji tkanek siatkówki z gałki ocznej ludzkich dawców pośmiertnych. Opisana tutaj technika pozwala na pobranie wysokiej jakości tkanek do celów transplantacyjnych, chirurgicznych lub badawczych bez uszkadzania pozostałych struktur gałki ocznej.

Uproszczona technika wycięcia rogówki in situ oraz ewakuacji tkanki siatkówki z ludzkiego gałki ocznej

Celem tego filmu jest przedstawienie zmodyfikowanej techniki biopsji mięśni szkieletowych Bergströma na ludziach.

Procedury biopsji mięśni szkieletowych człowieka z wykorzystaniem zmodyfikowanej techniki Bergströma

Poznaj technikę pobierania brodawek grzybowych z języka człowieka w celu badań molekularnych i histologicznych smaku. Ta metoda umożliwia uzyskanie żywych tkanek smakowych do analizy mechanizmów percepcji smaku u ludzi.

Technika pobierania brodawek grzybiastych (smakowych) z ludzkiego języka

Przeglądaj więcej filmów