JoVE Encyclopedia of Experiments
Neuronauka
0 wyświetleń • 1:23 min • March 4th, 2025
Weź chemicznie utrwalone, zatopione w parafinie skrawki mózgu od szczura z zawałem mózgu, gdzie ograniczony przepływ krwi powoduje śmierć komórek w dotkniętym obszarze.
Zanurz tkankę w ksylenie, aby rozpuścić parafinę.
Zanurz tkankę w bezalkoholowym alkoholu, aby usunąć resztki ksylenu.
Uwodnij tkankę, przepuszczając ją przez zmniejszające się stężenie alkoholu.
Opłucz chusteczkę wodą, aby usunąć resztki alkoholu.
Zastosuj hematoksylinę, podstawowy barwnik, który wiąże się z DNA, barwiąc jądra na fioletowo.
Spłucz wodą i kwaśnym alkoholem, aby usunąć nadmiar hematoksyliny.
Spłucz roztworem alkalicznym, aby zmienić kolor plamy jądrowej na niebieski.
Zastosuj eozynę, kwaśny barwnik, który barwi dodatnio naładowane białka cytoplazmatyczne i macierzy zewnątrzkomórkowej na różowo.
Odwodnić tkankę za pomocą zwiększającego stężenia alkoholu.
Zanurz tkankę w ksylenie, aby ją oczyścić, a następnie zamontuj i zwizualizuj pod mikroskopem.
Obszary kontrolne wydają się różowe z niebieskimi jądrami, podczas gdy obszary po zawale wydają się blade z powodu niewystarczającego zabarwienia spowodowanego śmiercią komórki.