JoVE Encyclopedia of Experiments
Neuronauka
0 wyświetleń • 1:18 min • March 4th, 2025
Chlamydia pneumoniae to bakterie chorobotwórcze, które mogą zainfekować ludzki mózg.
Aby wykryć te bakterie, weź zdeparafinowaną, ponownie nawodnioną, zakażoną bakteriami sekcję ludzkiego mózgu z odsłoniętymi antygenami białkowymi i inaktywowaną endogenną fosfatazą.
Dodaj roztwór blokujący, aby zapobiec niespecyficznemu wiązaniu przeciwciał.
Inkubować z przeciwciałami pierwszorzędowymi, które wiążą się z docelowym antygenem bakteryjnym.
Przemyć buforem w celu usunięcia niezwiązanych przeciwciał.
Dodaj roztwór blokujący, aby zwiększyć swoistość przeciwciała drugorzędowego.
Inkubować z przeciwciałami drugorzędowymi sprzężonymi z fosfatazą alkaliczną, które wiążą się z przeciwciałami pierwszorzędowymi.
Spłucz wodą, aby usunąć nadmiar przeciwciał.
Dodaj chromogenny substrat, który reaguje z fosfatazą alkaliczną, tworząc kolorowy osad.
Spłucz wodą, aby usunąć nadmiar osadu.
Dodaj barwnik do jąder barwnika.
Dodaj nośnik montażowy, aby zamontować sekcję.
Pod mikroskopem świetlnym wizualizuj barwione bakterie w tkance mózgowej.