JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 1:27 min. • March 4th, 2025
Odizoluj nerw wzrokowy od transgenicznych myszy z urazami mózgu w określonych odstępach czasu po urazie. Nerw zawiera neurony wyrażające białko fluorescencyjne.
Za pomocą mikroskopii fluorescencyjnej uwidocznij uszkodzony nerw, który wykazuje postępujący wzrost obrzęków i rozłączeń aksonów.
Napraw tkankę, aby zachować struktury komórkowe.
Opłucz chusteczkę, aby usunąć nadmiar utrwalacza.
Leczyć roztworem żelazocyjanku osmu, który wiąże się z lipidami osłonki mielinowej i zwiększa kontrast podczas obrazowania.
Opłucz tkankę, a następnie inkubuj w związku metalu ciężkiego, który wiąże się z makrocząsteczkami i zwiększa kontrast.
Odwodnić tkankę za pomocą zwiększającego stężenia alkoholu i zatopić w żywicy.
Uzyskaj przekroje poprzeczne i podłużne i potraktuj je związkami metali ciężkich, poprawiając kontrast.
Pod mikroskopem elektronowym przekroje podłużne ujawniają postępujący rozwój obrzęków aksonalnych z nagromadzonymi obrzękami mitochondriów, pęcherzykami, pęcherzykami błonowymi i zaburzonymi strukturami cytoszkieletu.
Przekroje poprzeczne wykazują postępujące rozerwanie osłonek mielinowych, co wskazuje na zwyrodnienie aksonów.