JoVE Encyclopedia of Experiments
Neuronauka
0 wyświetleń • 1:21 min • May 30th, 2025
Weź stały odcinek tkanki korowej mózgu myszy z aksonami neuronalnymi i dendrytami. Dendryty posiadają wypukłości, znane jako kolce dendrytyczne, które tworzą synapsy z aksonami.
Inkubuj tkankę z żelazocyjankiem osmu, który wiąże się z lipidami, a następnie ponownie zastosuj osm, który zwiększa kontrast strukturalny do obrazowania.
Barwnik ze związkiem metalu ciężkiego, który wiąże się z makrocząsteczkami i zwiększa kontrast.
Odwodnić za pomocą zwiększających się stężeń alkoholu do zatapiania żywicy.
Zanurz tkankę w żywicy, zamontuj ją na uchwycie i pokryj złotem, aby zoptymalizować jakość obrazowania.
Użyj skaningowej mikroskopii elektronowej ze skupioną wiązką jonów do obrazowania trójwymiarowego.
Użyj wiązki jonów, aby usunąć cienką warstwę tkanki osadzonej w żywicy, odsłaniając powierzchnię obrazowania.
Skoncentruj wiązkę elektronów na odsłoniętej powierzchni i wykryj elektrony rozproszone wstecznie, aby wygenerować obraz.
Wykonaj seryjne cięcie i obrazowanie oraz zrekonstruuj trójwymiarowy obraz, odsłaniając synaptycznie połączoną korową sieć neuronalną.