JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 6:05 min. • August 29th, 2025
Zabezpiecz znieczuloną ciężarną mysz z odsłoniętą macicą zawierającą zarodki przed neurulacją. Na tym etapie płytka nerwowa jest otwarta i bezpośrednio wystawiona na działanie płynu owodniowego.
Umieść wybrane zarodki na szalce Petriego z elastyczną membraną, aby je ustabilizować. Zabezpiecz zarodki i zastosuj sól fizjologiczną w celu nawodnienia.
Ustaw sondę ultradźwiękową nad zarodkiem i zmierz średnicę jamy owodniowej, aby obliczyć optymalną objętość wstrzyknięcia.
Umieścić igłę do nanoiniekcji zawierającą roztwór lentiwirusowy o wysokim mianie nad docelowym zarodkiem pod kątem zbliżonym do prostopadłego.
Wstrzyknąć precyzyjnie małą objętość do jamy owodniowej, delikatnie wycofać igłę i wyjąć sondę ultradźwiękową.
Delikatnie wepchnij zarodki z powrotem do wnętrza myszy.
Wstrzyknięty lentiwirus łączy się z komórkami płytki nerwowej, uwalniając swój materiał genetyczny, który ulega odwrotnej transkrypcji do DNA i jest integrowany z genomem gospodarza.
Umożliwia to stabilną manipulację genami w komórkach płytki nerwowej, wspierając potencjalne zastosowania terapeutyczne.
Za pomocą kleszczy przytrzymaj tkankę między zarodkami i ostrożnie wyciągnij oba rogi macicy z brzucha. Policz i ponumer
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych