JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 1:44 min. • August 29th, 2025
Zacznij od komórek guz chromochłonnego 12 lub PC12 szczura w podstawowych pożywkach wzrostowych.
Weź pokrytą kolagenem studzienkę zawierającą pożywkę różnicującą i umieść w niej komórki.
Inkubować, aby ułatwić adhezję komórek.
Weź degradowalny nanostrukturalny porowaty krzem lub folię PSi.
Pory filmu są wypełnione czynnikiem wzrostu nerwów lub NGF, który jest adsorbowany przez oddziaływania elektrostatyczne między ujemnie naładowanym NGF a dodatnio naładowaną powierzchnią PSi.
Umieść folię PSi obciążoną NGF w studzience i inkubuj.
Zmieniaj nośnik w regularnych odstępach czasu.
NGF w filmie PSi jest uwalniany do mediów przez dyfuzję i gdy rusztowanie krzemowe ulega degradacji.
Ten system dostarczania umożliwia ciągłe uwalnianie NGF w kontrolowanym tempie przez dłuższy czas.
NGF oddziałują z komórką PC12, umożliwiając jej przetrwanie oraz ułatwiając wzrost i rozgałęzianie się neurytów.
Wysiewaj jeden razy 10 do czwartego cellus na centymetr kwadratowy powierzchni roboczej na płytkach powlekanych typu colligen w obecności podłoża różnicującego. Umieść płytki w inkubatorze.
Po 24 godzinach w temperaturze 37 stopni Celsjusza dodaj świeży mysi nośnik z porowatego krzemu beta NGF lub NGF do każdej płytki i włóż płytki z powrotem do inkubatora.