JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Neuronauka
0 wyświetleń • 3:19 min. • August 29th, 2025
Zacznij od znieczulonej myszy z odsłoniętą czaszką.
Czaszka ma kraniotomię nad kością międzyciemieniową, po lewej stronie linii środkowej i ogonowo do szwu lambdoidalnego, z usuniętą oponą twardą w celu odsłonięcia móżdżku.
Odessaj boczny lewy móżdżek, aby odsłonić leżące pod nim grzbietowe jądro ślimaka lub DCN, strukturę pnia mózgu, która zawiera neurony przetwarzające sygnały słuchowe.
Dodaj sól fizjologiczną, aby zapobiec krzepnięciu krwi i usunąć resztki płynu.
Umieść mikrostrzykawkę zawierającą wektor wirusowy kodujący opsynę, światłoczuły kanał jonowy.
Opuścić igłę do DCN.
Wstrzyknąć zawiesinę wirusa w kontrolowanej szybkości, a następnie wycofać igłę.
Zszyj nacięcie i pozwól myszy dojść do siebie.
Wstrzyknięty wirus wiąże się z receptorami neuronalnymi DCN i ulega endocytozie.
Wewnątrz jądra neuronalnego wirusowe DNA wyzwala ekspresję genów, co prowadzi do produkcji opsyny.
Model jest gotowy do indukowanej światłem stymulacji drogi słuchowej.
Użyj pięciofrancuskiej rurki ssącej, aby zassać boczną najbardziej boczną część lewego móżdżku, pokrywającą DCN. Aby ułatwić aspirację, ustaw płaszczyznę ogniskową mikroskopu na oczekiwanej głębokości jądra ślimaka, aby poprawić wizualizację i za
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych