Akustoforeza wspomagana aptamerem do mikroprzepływowej separacji bakterii Gram-ujemnych

Weźmy mikroprzepływowy chip akustoforetyczny, separator cząstek na bazie fal dźwiękowych z dwoma wlotami i dwoma wylotami podłączonymi do plastikowych rurek.

Wstrzyknąć bakterie Gram-ujemne i Gram-dodatnie wraz z mikrogranulkami pokrytymi aptamerem przez wlot próbki.

Wstrzyknąć bufor przez wlot bufora pod wysokim ciśnieniem, aby utrzymać przepływ obok siebie.

Wewnątrz mikrokanału lipopolisacharydy na błonie bakteryjnej Gram-ujemnej wiążą się z krótkimi jednoniciowymi aptamerami DNA na mikrogranulkach.

Bakterie Gram-dodatnie, które nie mają lipopolisacharydów, nie wiążą się.

W miarę kontynuowania przepływu aktywuj przetwornik piezoelektryczny, aby generować fale akustyczne, które tworzą węzły ciśnienia w poprzek kanału.

Fale te popychają duże mikrogranulki związane z bakteriami Gram-ujemnymi w kierunku środka, gdzie są zbierane w docelowym wylocie.

Niezwiązane małe bakterie Gram-dodatnie pozostają nienaruszone i przepływają na boki do wylotu odpadów.

Obrazowanie mikroskopowe pokazuje zwiększony sygnał od kulek związanych z bakteriami Gram-ujemnymi w docelowym ujściu, potwierdzając ich selektywne oddzielenie za pomocą akustoforezy wspomaganej aptamerem.

Podłączyć rurki PEEK do dwóch wlotów w celu wstrzyknięcia dwóch próbek i bufora oraz do dwóch wylotów do zbierania i odprowadzania odpadów.

Za pomocą 10-mililitrowej strzykawki napełnij kanał akustoforezy mikroprzepływowej wodą demineralizowaną bez pęcherzyków. Przygotuj precyzyjny regulator ciśnienia z dwoma lub więcej kanałami wyjściowymi do sterowania przepływem płynu. Po przygotowaniu urządzenia wstrzyknąć próbkę i bufor, wywierając ciśnienie dwóch kilopaskali na wlocie próbki i czterech kilopaskali na wlocie buforu za pomocą precyzyjnego urządzenia do kontroli ciśnienia.

Za pomocą mikroskopu ustaw ostrość na koraliku i przesuń go do środka kanału mikroprzepływowego za pomocą PZT. Generuj częstotliwość rezonansową 3,66 megaherca za pomocą jednokanałowego generatora funkcyjnego i wzmacniaj typowy sygnał o 16 decybeli za pomocą wzmacniacza mocy. Obserwuj procesy separacji i wzbogacania na chipie akustofluidycznym za pomocą mikroskopu fluorescencyjnego i szybkiej kamery działającej z prędkością 1 200 klatek na sekundę.