Metoda mikrorozcieńczania bulionu do badania wrażliwości bakterii Gram-dodatnich na antybiotyki
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 5:35 min. • August 29th, 2025
Wyizoluj kolonie bakterii Gram-dodatnich z płytki hodowlanej i zawieś je w pożywce.
Rozcieńczyć zawiesinę, aby uzyskać optymalne stężenie bakterii do testu.
Zaszczepić studzienki testowe mikropłytki zawierającej rosnące stężenie antybiotyku lipoglikopeptydowego oraz studzienkę kontrolującą wzrost, zawierającą tylko pożywkę.
Rozprowadzić podwielokrotność z dobrze kontrolnej na płytkach hodowlanych w celu sprawdzenia czystości kultury i liczby bakterii.
Inkubuj, aby umożliwić wzrost bakterii, podczas którego syntetyzowana jest ściana komórkowa.
Antybiotyk wiąże się z peptydoglikanem, składnikiem ściany komórkowej i jego prekursorami, hamując polimeryzację i osłabiając ścianę.
Zakłócenie pozwala ciśnieniu osmotycznemu spowodować lizę komórek.
Po inkubacji potwierdzić czystość kultury i optymalną liczbę bakterii.
Sprawdź studzienki pod kątem rozwoju bakterii.
Studzienka kontrolna wykazuje widoczny wzrost, podczas gdy studzienka testowa o najniższym stężeniu antybiotyku, które całkowicie hamuje wzrost, wskazuje minimalne stężenie hamujące (MIC).
W tej demonstracji zostanie zaszczepiona jedna świeżo przygotowana płytka. Aby przygotować inokulum, wybierz kilka dobrze wyizolowanych kolonii z 18-24-g
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych