JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:06 min. • September 26th, 2025
Zacznij od płytki agarowej zawierającej kolonie Mycobacterium tuberculosis wyhodowane na pożywce wzbogaconej w składniki odżywcze.
Zaszczepij pojedynczą kolonię w bulionie uzupełnionym składnikami odżywczymi i inkubuj z mieszaniem, aby uzyskać równomierny wzrost.
Pozwól hodowli osiągnąć późną fazę logarytmiczną, w której komórki są metabolicznie aktywne.
Odpipetuj niewielką objętość na wzbogaconą płytkę agarową, rozprowadź ją równomiernie i inkubuj, aż utworzy się ciągła warstwa bakteryjna.
Zwilż sterylny wacik minimalnym podłożem o niskiej zawartości żelaza (LIMM) i zbierz bakterie.
Zawieś je w plastikowym pojemniku zawierającym LIMM, aby uniknąć zanieczyszczenia żelazem.
Dodaj środek dyspergujący, aby zapobiec zbrylaniu się i inkubować bez wstrząsania.
W warunkach ograniczających żelazo bakterie aktywują reakcje stresowe i wytwarzają siderofory w cytoplazmie.
Są one pakowane w pęcherzyki zewnątrzkomórkowe i uwalniane do otoczenia.
Siderofory wychwytują żelazo i pomagają bakteriom przetrwać.
System ten podkreśla adaptację i przeżycie prątków w warunkach ograniczonych poziomem żelaza
Zaszczepić pojedynczą kolonię MTB w dwóch mililitrach pożywki bulionowej prątków uzupełnionej wzbogaceniem ADN
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych