JoVE Encyclopedia of Experiments
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:22 min • September 26th, 2025
Zacznij od naczynia zawierającego nitkowatą kulturę sinic umieszczonego nad małym okienkiem wyposażonym w uchwyt zamontowany na diodzie LED w ciemnym pomieszczeniu.
Dioda LED oświetla antenę od dołu, tworząc małą strefę światła.
Podczas inkubacji nitkowate sinice migrują w kierunku oświetlonego środka, demonstrując fototaksję.
Z biegiem czasu sinice migrują i gromadzą się w oświetlonym centrum, tworząc widocznie gęstą strefę bakteryjną.
Po inkubacji umieść biały papier pod naczyniem, aby zwiększyć kontrast.
Zrób obraz oświetlonego obszaru i przeanalizuj go za pomocą oprogramowania.
Narysuj linię w poprzek naczynia, która przechodzi przez środek strefy bakteryjnej, aby wygenerować profil intensywności pikseli.
Porównaj średnią intensywność pikseli na zewnątrz i wewnątrz strefy bakteryjnej.
Następnie narysuj linię o maksymalnej intensywności w obszarze centralnym, aby określić średnicę strefy bakteryjnej, która reprezentuje fototaksję sinic.
Przygotuj oprawki LED, w których zamontowane są pięciomilimetrowe diody LED, aby naświetlić obszar 20 milimetrów kwadratowych od dołu do góry. Zmierz i dostosuj intensywność diod LED. Upewnij się, że całe ustawienie odbywa się w ciemnym pomieszczeniu lub zamkniętym, ciemnym pojemniku.
Umieść osiem mililitrów pożywki zawierającej P. lacuna na sześciocentymetrowej szalce Petriego, zamknij szalkę Petriego pokrywką i umieść ją na uchwycie LED tak, aby dioda LED znajdowała się w środku szalki Petriego. Zazwyczaj po dwóch dniach należy wykonać zdjęcie szalki Petriego za pomocą aparatu w smartfonie skierowanego bezpośrednio na pozycję zabiegu świetlnego. Użyj uchwytu i białego arkusza jako tła, aby zapewnić taką samą odległość i warunki oświetleniowe dla każdego zdjęcia.
Otwórz oprogramowanie ImageJ, kliknij Plik, Otwórz i wybierz plik. Następnie kliknij Enter. Wybierz prosty przycisk i naciśnij lewy przycisk myszy, aby narysować linię od jednego końca szalki Petriego do przeciwległego końca.
Upewnij się, że linia przechodzi przez środek okręgu włókien. Kliknij Analizuj i mierz, aby zobaczyć długość szalki Petriego. Następnie kliknij Analizuj i drukuj profil w menu ImageJ.
Oszacuj średnią wartość intensywności pikseli na zewnątrz okręgu i inną średnią wartość intensywności pikseli wewnątrz okręgu. Wskaż myszą pozycję Y między tymi wartościami, aby oszacować wartości X po obu stronach okręgu. Zanotuj obie wartości i oblicz różnicę.
Następnie wybierz prosty przycisk i narysuj linię o średniej maksymalnej wartości intensywności pikseli. Na koniec kliknij Analizuj, a następnie Zmierz, aby uzyskać długość wewnętrznego okręgu komórki.
Niniejsze badanie analizuje zachowanie fototaktyczne nitkowatych sinic w kontrolowanym środowisku świetlnym. Metodologia obejmuje pomiar migracji sinic w kierunku obszaru oświetlonego, co pozwala na uzyskanie informacji na temat ich odpowiedzi fototaktycznej.
Ten test umożliwia ilościowy pomiar zachowania fototaktycznego drobnoustrojów, wspierając walidację celów w badaniach nad mikroorganizmami fotosyntetyzującymi. Dzięki zapewnieniu powtarzalnej metody oceny migracji skierowanej światłem, ułatwia on redukcję ryzyka mechanistycznego przy wyborze szczepów cyjanobakterii do zastosowań w bioprodukcji. Podejście to zapewnia pewność prognostyczną w wiązaniu modyfikacji genetycznych lub środowiskowych z funkcjonalnymi efektami fenotypowymi w początkowych etapach procesów odkrywczych.
Analiza ta wpisuje się w zakres od wczesnych etapów odkrywania po przepływy pracy przedkliniczne, stanowiąc narzędzie do przesiewowego badania fenotypowego w inżynierii mikroorganizmów fotosyntetyzujących.
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Powiązane filmy
0 Wyświetlenia
Ostatnia aktualizacja: 29 sierpnia 2026