JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:39 min. • September 26th, 2025
Zacznij od znieczulonych zarodków danio pręgowanego, którym wstrzyknięto fluorescencyjnie znakowane bakterie chorobotwórcze, samodzielnie lub zmieszane z mikrosferami biomateriału, aby modelować infekcję związaną z biomateriałem in vivo.
Umieścić szalkę Petriego zawierającą podłoże podstawowe ze środkiem znieczulającym na stoliku stereofluorescencyjnego mikroskopu wyposażonego w odpowiednie filtry.
Dodaj roztwór metylocelulozy do naczynia, aby stworzyć lepkie podłoże, które unieruchamia zarodki do obrazowania.
Przenieść poszczególne zarodki do metylocelulozy i wyrównać je poziomo, upewniając się, że miejsce wstrzyknięcia jest widoczne.
Korzystając z filtra jasnego pola, skup się na miejscu wstrzyknięcia, aby celować w zainfekowany obszar.
Ustaw parametry obrazowania Z-stack i uzyskuj obrazy fluorescencyjne na różnych głębokościach, aby uchwycić dynamikę infekcji w trzech wymiarach.
Korzystając z oprogramowania, analizuj obrazy uchwycone w czasie, aby określić ilościowo intensywność fluorescencji i monitorować rozmieszczenie bakterii.
Protokół ten umożliwia bezpośrednie porównanie progresji infekcji w żywych zarodkach z ekspozycją na biomateriał i bez niej.
Umieścić 100-milimetrową szalkę P
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych