JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:07 min. • September 26th, 2025
Weź szkiełko nakrywkowe z fotodegradowalną warstwą hydrożelu, która zawiera uwięzione kolonie bakterii, genetycznie zmodyfikowane w celu emitowania fluorescencji.
Umieść szkiełko nakrywkowe w uchwycie.
Dodaj pożywkę, aby zapobiec odwodnieniu próbki.
Pod mikroskopem jasnego pola skup się na pojedynczej interesującej nas kolonii.
Korzystając z odpowiedniego oprogramowania, zaprojektuj wzór świetlny do ekstrakcji komórek na obrzeżach kolonii, aby rozbić wiązania strukturalne hydrożelu i zminimalizować ekspozycję komórek na promieniowanie UV.
Dostosuj natężenie światła UV i czas ekspozycji.
Zainicjuj ekspozycję na światło UV, aby zerwać wiązania strukturalne w hydrożelu w odsłoniętych obszarach, które ułatwiają uwalnianie docelowej kolonii.
Za pomocą filtra fluorescencyjnego zidentyfikuj kolonię.
Umieść końcówkę rurki w tym miejscu, tak aby drugi koniec był podłączony do strzykawki.
Przełącz się w tryb jasnego pola i za pomocą strzykawki odessaj uwolnioną kolonię.
Przenieś kolonię do probówki w celu dalszej analizy.
Umieść próbkę w uchwycie PDMS i dodaj zdefiniowane podłoże na próbce, aby zapobiec odwodnieniu próbki i zapewnić roztwór nośnikowy dla uwolnionych komórek. Po ustawieniu lustra kalibr
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych