Ukierunkowana izolacja kolonii bakteryjnych za pomocą degradacji hydrożelu o jasnym wzorze

0 views • 3:07 min • September 26th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Weź szkiełko nakrywkowe z fotodegradowalną warstwą hydrożelu, która zawiera uwięzione kolonie bakterii, genetycznie zmodyfikowane w celu emitowania fluorescencji.

Umieść szkiełko nakrywkowe w uchwycie.

Dodaj pożywkę, aby zapobiec odwodnieniu próbki.

Pod mikroskopem jasnego pola skup się na pojedynczej interesującej nas kolonii.

Korzystając z odpowiedniego oprogramowania, zaprojektuj wzór świetlny do ekstrakcji komórek na obrzeżach kolonii, aby rozbić wiązania strukturalne hydrożelu i zminimalizować ekspozycję komórek na promieniowanie UV.

Dostosuj natężenie światła UV i czas ekspozycji.

Zainicjuj ekspozycję na światło UV, aby zerwać wiązania strukturalne w hydrożelu w odsłoniętych obszarach, które ułatwiają uwalnianie docelowej kolonii.

Za pomocą filtra fluorescencyjnego zidentyfikuj kolonię.

Umieść końcówkę rurki w tym miejscu, tak aby drugi koniec był podłączony do strzykawki.

Przełącz się w tryb jasnego pola i za pomocą strzykawki odessaj uwolnioną kolonię.

Przenieś kolonię do probówki w celu dalszej analizy.

Umieść próbkę w uchwycie PDMS i dodaj zdefiniowane podłoże na próbce, aby zapobiec odwodnieniu próbki i zapewnić roztwór nośnikowy dla uwolnionych komórek. Po ustawieniu lustra kalibracyjnego na miejscu, wyreguluj ostrość mikroskopu, aby uzyskać ostry obraz kolonii w układzie hydrożelu lub mikrostudzienki i sprawdź, aby zidentyfikować kolonie lub studzienki będące przedmiotem zainteresowania.

Tutaj zaprojektuj wzory świetlne, podczas gdy widok kamery pokazuje kolonie wewnątrz próbki, aby przetestować różne wzorce ekstrakcji komórek i zapisać zdefiniowany wzór. Następnie wybierz sekcję kontroli sesji, dodaj zapisaną sekwencję w zakładce zatytułowanej nazwą produktu narzędzia do wzorzystego oświetlenia. Wybierz opcję stymulowania wzoru do wyświetlenia i dostosuj żądane położenie ekspozycji.

Następnie dostosuj natężenie światła do 60%, a czas ekspozycji do 40 sekund pod zakładką sterowania LED i rozpocznij proces ekspozycji. Monitoruj degradację hydrożelu w czasie rzeczywistym i w trybie Brightfield, aby zapewnić uwolnienie ogniw. Aby zebrać uwolnioną komórkę, zmień filtr mikroskopu z Brightfield na TRITC, aby uwidocznić odsłonięty obszar próbki gołym okiem.

Po zlokalizowaniu odsłoniętego obszaru umieść koniec rurki na napromieniowanym miejscu, a następnie zmień filtr mikroskopu z powrotem na Brightfield, aby monitorować pobieranie komórek w czasie rzeczywistym. Za pomocą strzykawki przymocowanej do drugiego końca rurki ostrożnie pobrać 200 mikrolitrów roztworu zawierającego uwolnione komórki i przenieść roztwór do 1,5-milimetrowej probówki wirówkowej w celu analizy DNA lub posiewu

10:45

Tworzenie i modelowanie hydrożeli za pośrednictwem światła do zastosowań w hodowlach komórkowych

Related Videos

0 Views

11:51

Wielodołkowy test na bazie poliakrylamidu do badania wpływu sztywności macierzy zewnątrzkomórkowej na infekcję bakteryjną przylegających komórek

Related Videos

0 Views

07:34

Izolacja pojedynczych wewnątrzkomórkowych zbiorowisk bakteryjnych wygenerowanych z mysiego modelu infekcji dróg moczowych do dalszej analizy pojedynczych komórek

Related Videos

0 Views

02:25

Fotodegradowalna izolacja kolonii bakteryjnych na bazie hydrożelu w układach mikrodołków

Related Videos

0 Views

03:27

Wzorce mikroprzepływowe i śledzenie wzrostu bakterii jednokomórkowych na podstawie fluorescencji

Related Videos

0 Views

02:11

Stabilizacja wzorców hydrożelu bakteryjnego za pośrednictwem włókien Curli

Related Videos

0 Views

09:19

Wzorowanie bioaktywnych białek lub peptydów na hydrożelu przy użyciu fotochemii do zastosowań biologicznych

Related Videos

0 Views

08:10

Wykonanie i wdrożenie bezreferencyjnej platformy mikroskopii sił trakcyjnych

Related Videos

0 Views

08:33

Kinetyczna wizualizacja jednokomórkowych międzygatunkowych interakcji bakteryjnych

Related Videos

0 Views

07:28

Fotodegradowalne interfejsy hydrożelowe do badań przesiewowych, selekcji i izolacji bakterii

Related Videos

0 Views

Last updated: 11 July 2026