Test Coincubation do badania konkurencyjnych interakcji między szczepami bakterii

0 wyświetleń2:37 min • September 26th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Zacznij od dwóch szczepów bakteryjnych, referencyjnego i konkurenta, z których każdy wyraża odrębny marker fluorescencyjny do identyfikacji szczepu.

Wymieszaj szczepy w równych proporcjach i umieść mieszaninę na talerzu agarowym.

Inkubuj płytkę, aby umożliwić szczepom wzrost i interakcję.

Konkurent konkuruje z odkształceniem odniesienia dzięki mechanizmom zależnym od kontaktu lub niezależnym od kontaktu.

W konkurencji zależnej od kontaktu, zawodnik wykorzystuje wyspecjalizowane systemy wydzielania do dostarczania toksyn bezpośrednio do szczepu referencyjnego.

W konkurencji niezależnej od kontaktu zawodnik uwalnia toksyny, które dyfundują do otaczającego podłoża i dostają się do szczepu referencyjnego.

Toksyny te zakłócają podstawowe procesy w szczepie referencyjnym, w tym syntezę ściany komórkowej, replikację DNA i syntezę białek, prowadząc do zatrzymania wzrostu, śmierci komórki i zmniejszonej ekspresji fluorescencji.

Po inkubacji zbadaj płytkę pod mikroskopem fluorescencyjnym.

Zmniejszona fluorescencja w szczepie referencyjnym, w porównaniu z jaśniejszą fluorescencją konkurenta, wskazuje na interakcje konkurencyjne.

Aby wymieszać szczep referencyjny i szczep konkurencji w stosunku jeden do jednego, dodaj 100 mikrolitrów każdego szczepu znormalizowanego do OD 1,0 do oznakowanej 1,5 mililitrowej probówki wirówkowej i wiruj przez jedną do dwóch sekund. Jako kontrolę, wymieszaj szczep referencyjny z różnie oznaczoną wersją samego siebie, a także wirem.

Bardzo ważne jest, aby osiągnąć prawidłowy współczynnik początkowy, ponieważ może to znacznie zmienić wynik eksperymentu. Aby zapewnić sukces, ten krok może wymagać optymalizacji dla danego gatunku bakterii. Po powtórzeniu tego kroku dla każdej kontrpróby biologicznej powinny istnieć cztery kontrpróby biologiczne ze szczepami referencyjnymi znakowanymi różnicowo jako kontrolami oraz cztery kontrpróby biologiczne ze szczepami referencyjnymi i konkurencyjnymi znakowanymi różnicowo.

Aby uzyskać plamki hodowlane, które zostaną użyte do mikroskopii fluorescencyjnej po inkubacji, dodaj 10 mikrolitrów każdej mieszaniny kontrolnej i doświadczalnej na płytkę Petriego zawierającą agar LBS. Po całkowitym wyschnięciu plam na ławce inkubuj płytki w temperaturze 24 stopni Celsjusza przez 24 godziny.

10:56

Komplementarne zastosowanie technik mikroskopowych i odczytu fluorescencji w badaniu interakcji kryptokokus z amebą

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

07:00

Wysokoprzepustowe testy kokultur do badania interakcji mikrobiologicznych

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

08:19

Narzędzia mikroprzepływowe do badania interakcji grzybowo-mikrobiologicznych na poziomie komórkowym

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

03:30

Test in vitro do badania interakcji mikroorganizmów w kokulturze

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

03:55

Test koinkubacji bakterii: technika oparta na mikroskopii fluorescencyjnej do wizualizacji wewnątrzgatunkowej konkurencji bakteryjnej na poziomie pojedynczej komórki

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

05:28

Test infekcji bakteryjnej do badania interakcji bakterii beztlenowych z komórkami gospodarza

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

08:45

Test wizualny do monitorowania konkurencji bakteryjnej za pośrednictwem T6SS

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

06:45

Monitorowanie konkurencji wewnątrzgatunkowej w populacji komórek bakteryjnych poprzez kohodowlę szczepów znakowanych fluorescencyjnie

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

12:22

Materiały biomimetyczne do charakteryzowania interakcji bakteria-gospodarz

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

07:42

Test odroczonego hamowania wzrostu w celu ilościowego określenia wpływu środków przeciwdrobnoustrojowych pochodzenia bakteryjnego na konkurencję

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

Ostatnia aktualizacja: 15 sierpnia 2026