JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:21 min. • September 26th, 2025
Weź naczynie zawierające znieczuloną larwę danio pręgowanego.
Nanieś kroplę niskotopliwej agarozy na larwę i delikatnie ustaw ją na boki, aby umożliwić dostęp do jelita podczas wstrzykiwania.
Teraz krótko ostudź agarozę, aby ją zestalić, unieruchamiając w ten sposób larwę.
Dodaj pożywkę zawierającą środek znieczulający, aby utrzymać larwę w znieczuleniu.
Następnie należy pobrać zawiesinę znakowanej fluorescencyjnie bakterii Clostridioides difficile, bakterii chorobotwórczej, i dodać barwnik znacznikowy, aby ułatwić monitorowanie wstrzyknięcia.
Załadować tę mieszaninę do igły do mikroiniekcji i zamontować igłę na mikromanipulatorze.
Pod mikroskopem stereoskopowym ustawić igłę pod kątem skierowanym w stronę jelita larwalnego.
Następnie delikatnie wprowadzić końcówkę igły do światła jelita.
Wstrzyknij bakterie bezpośrednio do światła i potwierdź pomyślne dostarczenie za pomocą barwnika znacznikowego. Następnie wycofać igłę.
Za pomocą mikroskopii fluorescencyjnej potwierdź lokalizację Clostridioides difficile w jelicie larwalnym.
Najpierw umieść kroplę 0,8% niskotopliwej agarozy na larwach danio pręgowanego na szalce Petriego, aby przykryć. Delikatnie ustaw larwy w pozycji bocznej. Umieść szalkę
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych