Wysokoprzepustowa identyfikacja polimerów odpychających bakterie za pomocą badań przesiewowych mikromacierzy

Umieść wysterylizowane, pokryte agarozą szkiełko mikromacierzy z wieloma plamkami polimerowymi na płytce wielodołkowej. Agaroza minimalizuje niespecyficzne wiązanie bakteryjne.

Dodać mieszaną kulturę bakterii do szkiełka i inkubować ją, delikatnie mieszając.

Bakterie wydzielają wyraźne białka adhezyjne, które wiążą się z korzystnymi plamkami polimerowymi, co z czasem powoduje silniejsze przyczepienie się bakterii i kolonizację.

I odwrotnie, polimery odstraszające są odporne na adsorpcję białek i zmniejszają przyczepianie się bakterii.

Przepłukać szkiełko solą fizjologiczną buforowaną fosforanami lub PBS w celu usunięcia luźno związanych bakterii.

Dodaj DAPI, aby wybarwić DNA bakterii przyczepionych do powierzchni.

Umyj szkiełko PBS, osusz je i uszczelnij samoprzylepnym szkiełkiem nakrywkowym.

Wysterylizuj zewnętrzną powierzchnię szkiełka etanolem.

Uchwyć obrazy w jasnym polu, aby zlokalizować plamki polimerowe. Następnie przełącz się w tryb fluorescencji, aby wykryć fluorescencję na plamkach polimerowych.

Plamki polimerowe, które wykazują zmniejszoną fluorescencję, wskazują na minimalne przyczepienie bakterii i są identyfikowane jako polimery odstraszające bakterie.

Po wyhodowaniu i przygoto