Wysokoprzepustowa identyfikacja polimerów odpychających bakterie za pomocą badań przesiewowych mikromacierzy

0 wyświetleń2:49 min • September 26th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Umieść wysterylizowane, pokryte agarozą szkiełko mikromacierzy z wieloma plamkami polimerowymi na płytce wielodołkowej. Agaroza minimalizuje niespecyficzne wiązanie bakteryjne.

Dodać mieszaną kulturę bakterii do szkiełka i inkubować ją, delikatnie mieszając.

Bakterie wydzielają wyraźne białka adhezyjne, które wiążą się z korzystnymi plamkami polimerowymi, co z czasem powoduje silniejsze przyczepienie się bakterii i kolonizację.

I odwrotnie, polimery odstraszające są odporne na adsorpcję białek i zmniejszają przyczepianie się bakterii.

Przepłukać szkiełko solą fizjologiczną buforowaną fosforanami lub PBS w celu usunięcia luźno związanych bakterii.

Dodaj DAPI, aby wybarwić DNA bakterii przyczepionych do powierzchni.

Umyj szkiełko PBS, osusz je i uszczelnij samoprzylepnym szkiełkiem nakrywkowym.

Wysterylizuj zewnętrzną powierzchnię szkiełka etanolem.

Uchwyć obrazy w jasnym polu, aby zlokalizować plamki polimerowe. Następnie przełącz się w tryb fluorescencji, aby wykryć fluorescencję na plamkach polimerowych.

Plamki polimerowe, które wykazują zmniejszoną fluorescencję, wskazują na minimalne przyczepienie bakterii i są identyfikowane jako polimery odstraszające bakterie.

Po wyhodowaniu i przygotowaniu inokulantów do mikromacierzy, zgodnie z protokołem tekstowym, umieść wysterylizowane promieniami UV mikromatryce polimerowe na prostokątnych płytkach czterodołkowych i dodaj sześć mililitrów mieszanych kultur bakteryjnych. Inkubować płytki w temperaturze 37 stopni Celsjusza z delikatnym mieszaniem przez pięć dni. Po inkubacji użyj PBS, aby delikatnie przepłukać mikromacierze dwukrotnie.

Następnie dodaj jeden mikrogram na mililitr DAPI w PBS i inkubuj przez 30 minut. Następnie przenieś mikromacierze na świeżą płytkę czterodołkową, przykryj mikromacierze PBS, a następnie delikatnie zawiruj. Następnie wymień PBS raz i powtórz pranie.

Po wypłukaniu wysuszyć mikromacierze pod strumieniem powietrza, a następnie nałożyć folię uszczelniającą i przymocować szkiełka szklane do szkiełek do szkiełek do mikromacierzy. Gdy klej wyschnie, użyj 70% etanolu do sterylizacji zewnętrznej powierzchni. Za pomocą mikroskopu fluorescencyjnego, wyposażonego w 20-krotny obiektyw, uchwyć pojedyncze obrazy dla każdej plamki polimerowej w jasnym polu i kanałach DAPI.

09:05

Wytwarzanie mikromacierzy przeciwciał z kodami kreskowymi o dużej gęstości pod kontrolą przepływu

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

12:04

Wysokowydajna platforma mikromacierzy komórkowych do korelacyjnej analizy różnicowania komórek i sił trakcyjnych

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

07:12

Profilowanie polimerów w mikromacierzy (MAPP) do wysokoprzepustowej analizy glikanów

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

11:59

Konkurencyjne badania genomowe bibliotek drożdży z kodami kreskowymi

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

13:37

Mikromacierze polimerowe do wysokowydajnego odkrywania biomateriałów

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

10:44

Podejście do badań przesiewowych materiałów z przewodnikiem w celu opracowania ilościowych mikromacierzy białkowych pochodzących zol-żel

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

07:35

Demonstracja wielolekoopornej mikromacierzy amplifikacyjnej Mycobacterium tuberculosis

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

08:38

Badania przesiewowe interakcji białko-białko w całym genomie za pomocą testu komplementacji fragmentów białka (PCA) w żywych komórkach

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

12:02

Zautomatyzowana, modułowa, wysokowydajna platforma przesiewowa egzopolisacharydów w połączeniu z bardzo czułą analizą odcisków palców węglowodanów

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

11:31

Opracowanie wysokowydajnego zestawu do badań przesiewowych małych cząsteczek, które modulują sygnalizację c-di-GMP u Pseudomonas aeruginosa

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

Ostatnia aktualizacja: 1 sierpnia 2026