JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:13 min. • September 26th, 2025
Weźmy posiew Bacillus megaterium, bakterii Gram-dodatniej.
Rozcieńczyć kulturę w świeżych pożywkach i inkubować ją przez wstrząsanie, aby pobudzić podział bakterii.
Przenieś kulturę do probówki i odwiruj, aby otulić bakterie.
Usunąć supernatant i ponownie zawiesić osad w pożywkach zawierających stabilizatory osmotyczne, aby zapobiec lizie protoplastów.
Przenieść zawieszony roztwór do kolby, dodać lizozym i inkubować, wstrząsając.
Podczas inkubacji lizozym degraduje grubą ścianę komórkową peptydoglikanu bakterii.
W miarę degradacji ściany komórkowej bakterie zmieniają się z formy pręcika w kuliste ciała ograniczone tylko błoną plazmatyczną, tworząc protoplasty.
Wizualizuj zawiesinę pod mikroskopem.
Bakterie o okrągłym kształcie potwierdzają tworzenie się protoplastów, podczas gdy spuchnięte bakterie w kształcie pręcików wskazują na niepełne trawienie.
Przenieś roztwór do probówki i odwiruj, aby osadzać protoplasty.
Usunąć supernatant i ponownie zawiesić protoplasty w świeżych pożywkach zawierających stabilizatory osmotyczne do dalszej analizy.
Aby przygotować protoplasty Gram-dodatniego B. megaterium , rozcieńczyć nocną kulturę bakteryjną w stosunku jeden do 1000 w 100 mililitrach trzyprocento
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych