Wielodołkowy test na bazie płynu do badań przesiewowych nokautów C. elegans

0 views • 2:35 min • September 26th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Weź płytkę wielodołkową zawierającą podłoże agarowe wstępnie nakrapiane bakteriami RNAi, z lub bez wkładki specyficznej dla genu ukierunkowanej na gen C. elegans .

Wysiewanie zsynchronizowało robaki w stadium L1 ze studzienkami i inkubowało je, aby umożliwić odżywianie się bakteriami RNAi.

Wstawka wytwarza interferujące RNA, które celuje w określone geny robaków, generując fenotyp nokautu specyficzny dla genu.

Dodaj bufor do studzienek i delikatnie ponownie zawieś robaki.

Przenieś zawiesinę na płytę głębinową i pozwól robakom osiąść grawitacyjnie.

Usunąć supernatant, zachowując pewien bufor.

Umyj robaki buforem, a następnie wyrzuć supernatant, pozostawiając niewielką ilość buforu.

Następnie weź wielodołkową płytkę testową zawierającą bakterie chorobotwórcze.

Dozuj określoną liczbę robaków kontrolnych i knockdown do odpowiednich studzienek, aby umożliwić interakcje gospodarz-patogen. Bakterie chorobotwórcze wydzielają związki, które indukują śmiertelność robaków.

Porównaj śmiertelność robaków, aby ocenić wpływ specyficznego dla genu knockdownu na przeżycie robaków.

Dodaj jeden mililitr S Basal na dołek 24-dołkowej płytki zawierającej 300 robaków na studzienkę. Delikatnie porusz robaki, potrząsając płytką, a następnie przenieś robaki na pustą, sterylną płytkę z 24 głębokimi dołkami.

Pozwól robakom osiąść grawitacyjnie, około pięciu minut. Odessać supernatant, pozostawiając około jednego mililitra na studzienkę, a następnie dodać 7 mililitrów S Basal do każdej studzienki. Powtórz pranie jeszcze dwa razy, a następnie po ostatnim praniu odessaj wszystko, oprócz około 400 mikrolitrów supernatantu.

Po pipetowaniu bakterii do płytek 384-dołkowych, aby uniknąć głodu, korzystając z funkcji ponownego pobierania próbek sortownika robaków, posortuj 22 robaki do każdej studzienki płytki 384-dołkowej. Na koniec, po sortowaniu, dodaj małe cząsteczki lub inne materiały specyficzne dla eksperymentu.

11:31

Opracowanie wysokowydajnego zestawu do badań przesiewowych małych cząsteczek, które modulują sygnalizację c-di-GMP u Pseudomonas aeruginosa

Related Videos

0 Views

11:58

Nicienie Caenorhabditis elegans - wszechstronny model in vivo do badania interakcji gospodarz-mikroorganizm

Related Videos

0 Views

11:40

Wysokoprzepustowe badania przesiewowe izolatów drobnoustrojów mające wpływ na zdrowie Caenorhabditis elegans

Related Videos

0 Views

14:53

Wysokoprzepustowe badania przesiewowe i biodetekcja z fluorescencyjnymi szczepami C. elegans

Related Videos

0 Views

09:40

Badania przesiewowe RNAi w celu identyfikacji fenotypów postembrionalnych u C. elegans

Related Videos

0 Views

10:58

Ilościowe i zautomatyzowane wysokoprzepustowe badania przesiewowe RNAi całego genomu u C. elegans

Related Videos

0 Views

03:15

Karmienie RNAi w hodowli płynnej: wysokoprzepustowa metoda obniżania ekspresji genów u C. elegans

Related Videos

0 Views

06:28

C. elegans Test chemotaktyksy

Related Videos

0 Views

18:38

Wielkoskalowy knockdown genów u C. elegans przy użyciu bibliotek zasilających dsRNA do generowania odpornych fenotypów utraty funkcji

Related Videos

0 Views

11:43

Przesiewowy test in vivo dla modulatorów mitochondrialnych przy użyciu transgenicznych bioluminescencyjnych Caenorhabditis elegans

Related Videos

0 Views

Last updated: 18 July 2026