Kolorymetryczne wykrywanie degradacji kory mózgowej podczas kiełkowania przetrwalników bakteryjnych

0 wyświetleń3:05 min • September 26th, 2025

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Zarodnik bakterii pozostaje uśpiony z powodu warstwy kory peptydoglikanu, polimeru cukrów i aminokwasów.

Podczas kiełkowania kora ulega degradacji, aby uwolnić cukry do otaczającego podłoża.

Aby wykryć degradację kory mózgowej, zacznij od pożywki zawierającej uwolnione cukry, zebrane w określonych punktach czasowych podczas kiełkowania zarodników.

Dla celów informacyjnych należy stosować rosnące stężenia norm cukru.

Wzorce i próbki poddano wcześniejszej obróbce w celu przekształcenia cukrów w formę reaktywną.

Inkubować z odczynnikiem Ehrlicha, odczynnikiem do wykrywania kolorymetrycznego, który reaguje z cukrami i tworzy kompleks o fioletowym kolorze.

Przenieść mieszaniny na płytkę wielodołkową i zmierzyć absorbancję kolorowych kompleksów za pomocą czytnika mikropłytek.

Absorbancja odpowiada intensywności koloru fioletowego, która jest wprost proporcjonalna do stężenia cukru.

Wzrost absorbancji w próbkach w punktach czasowych wskazuje na postępującą degradację kory.

Wygeneruj wykres na podstawie stężeń wzorcowych i określ ilościowo stężenia próbki.

Gdy próbki znajdują się na lodzie, przygotuj odczynnik barwiący. Rozpuść 0,320 grama DMAB w 1,9 mililitra lodowatego kwasu octowego. Należy pamiętać, że ten odczynnik jest wrażliwy na czas, temperaturę i światło i nie powinien być wykonywany z wyprzedzeniem.

Po całkowitym rozpuszczeniu DMAB dodać 100 mikrolitrów 10 normalnych kwasów solnych i odwirować próbkę. Następnie dodaj pięć mililitrów lodowatego kwasu octowego i ponownie wiruj. W przypadku reakcji kolorymetrycznej przenieś 100 mikrolitrów każdej schłodzonej kory lub próbki kontrolnej do nowej 1,5-mililitrowej probówki mikrowirówkowej.

Do każdej próbki dodać 700 mikrolitrów świeżo przygotowanego roztworu barwnego. Natychmiast przenieść próbki do łaźni wodnej o temperaturze 37 stopni Celsjusza i inkubować próbki dokładnie przez 20 minut. Po inkubacji przenieść 200 mikrolitrów każdej próbki na przezroczystą 96-dołkową płytkę.

Próbki powinny być początkowo koloru żółtego, ale zmienią kolor na fioletowy, jeśli obecny jest cukier redukujący, który wskazuje na obecność kory. W tym przypadku wiele próbek nie ma widocznego fioletowego koloru. Jednak próbki 250, 500 i 5000 nanomoli wydają się wizualnie różnić od nanomoli zero kontroli negatywnej.

Za pomocą czytnika płytek określ absorbancję przy 585 nanometrach. Przy pomiarze w średnicy zewnętrznej 585 nanometrów, sygnał generowany z próbek wzorcowych najlepiej pasuje do regresji liniowej.

10:03

Badanie szkodliwego wpływu niskociśnieniowej sterylizacji plazmowej na przeżywalność zarodników Bacillus subtilis przy użyciu mikroskopii żywych komórek

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

08:58

Wizualizacja germinosomów i błony wewnętrznej w zarodnikach Bacillus subtilis

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

06:39

Poprawa liczenia zarodników Bacillus subtilis i analizy znaczników w cytometrii przepływowej

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

14:14

Wizualizacja organizacji i dynamiki kory mózgowej w mikroorganizmach przy użyciu mikroskopii fluorescencyjnej z całkowitym wewnętrznym odbiciem

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

02:15

Wizualizacja białek kiełkujących w błonie wewnętrznej zarodników bakterii

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

10:39

Pomiary pojedynczych komórek pęknięcia wakuolarnego spowodowanego przez patogeny wewnątrzkomórkowe

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

08:35

Wykrywanie fragmentów kory mózgowej podczas kiełkowania przetrwalników bakteryjnych

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

08:42

Wizualna i mikroskopowa ocena mutantów rozwojowych Streptomyces

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

07:44

Zastosowanie selektywnych barwników fluorescencyjnych błonowych i ścian komórkowych do obrazowania żywych komórek grzybów strzępkowych

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

06:58

Połączenie mikroskopii oczyszczającej i fluorescencyjnej w celu wizualizacji zmian w ekspresji genów i reakcjach fizjologicznych na Plasmodiophora brassicae

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

Ostatnia aktualizacja: 1 sierpnia 2026