JoVE Encyclopedia of Experiments
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:52 min • October 30th, 2025
Rozpocznij od zaszczepienia zawiesiny bakterii redukujących ilość metali do pożywki hodowlanej jonami metali.
Inkubuj z rotacją, aby pobudzić wzrost i ułatwić pobieranie jonów metali.
Jony metali dyfundują do komórek i są enzymatycznie redukowane do nierozpuszczalnych tlenków metali.
Tlenki te są wydalane i zarodkują w pobliżu błony bakteryjnej, gdzie samoorganizują się w sztywne mikrokapsułki tlenku metalu na zewnątrz komórek.
Po inkubacji przeprowadzić ultradźwięki zawiesiny, aby oddzielić bakterie od mikrokapsułek.
Odwirować mieszaninę, aby uzyskać gęste mikrokapsułki i wyrzucić supernatant.
Umyj granulkę wodą, a następnie wykonaj ultradźwięki. Ponownie odwirować, aby oddzielić bakterie od mikrokapsułek.
Następnie dodaj etanol, aby zmniejszyć napięcie powierzchniowe.
Ponownie wykonać ultradźwięki, aby usunąć wszelkie pozostałe bakterie i rozproszyć mikrokapsułki.
Ponownie odwirować i wyrzucić supernatant.
Powtórz płukanie etanolem.
Na koniec uszczelnij probówki, aby zapobiec wysuszeniu i deformacji oczyszczonych mikrokapsułek.
Pobrać kulturę zawierającą bakterie monoklonalne i dodać 50 mikrolitrów do każdej z dziesięciu 50-mililitrowych probówek wirówkowych zawierających pożywkę wolframianową sodu.
Inkubuj dziesięć probówek w inkubatorze o temperaturze 37 stopni Celsjusza przez 120 godzin. Po inkubacji umieść każdą z probówek w ultrasonografie i poddaj komórki sonifikacji przy 20 kilohercach z mocą 150 watów przez jedną godzinę.
Odwirować probówki, a następnie usunąć klarowny płyn za pomocą pipety.
Następnie dodaj wodę, a następnie poddaj sonikację i odwiruj probówki jeszcze raz.
Po drugim odwirowaniu usunąć klarowny płyn z probówek za pomocą pipety.
Następnie dodaj 35 mililitrów 99,8% etanolu i ponownie wykonaj ultradźwięki próbek.
Wypłucz minerały, odwirowując je, dodając alkohol i ponownie sonikując próbkę.
Następnie usunąć przezroczysty płyn z probówek za pomocą pipety i natychmiast zakryć probówki, nie wysuszając próbki.