JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 6:37 min. • October 30th, 2025
Zacznij od mikropłytki zawierającej homogenaty przygotowane z much Drosophila . Muchy te miały kontrolowaną populację określonej bakterii w jelitach.
Homogenaty zawierają lizowane tkanki much i uwolnione bakterie jelitowe.
Odessać zawieszone bakterie i seryjnie rozcieńczyć na wielu mikropłytkach.
Małe objętości z każdego rozcieńczenia należy rozprowadzić na płytkach agarowych, upewniając się, że kropelki pozostają oddzielone.
Inkubuj, aby bakterie mogły namnażać się w widoczne kolonie.
Uchwyć obrazy płytek, aby określić ilościowo jednostki tworzące kolonie (CFU), które reprezentują liczbę żywotnych komórek bakteryjnych zdolnych do tworzenia pojedynczych kolonii.
Korzystając z oprogramowania do analizy obrazu, wyrównaj każdy obraz za pomocą linii odniesienia, zdefiniuj granicę i zastosuj jednolitą siatkę, aby podzielić go na strefy zliczania, z których każda odpowiada jednemu punktowi.
Dostosuj próg jasności, aby odróżnić poszczególne kolonie od tła, a następnie uruchom analizę, aby policzyć kolonie w każdym miejscu i określić ilościowo CFU.
Umieść trzy prostokątne płytki do wzrostu agaru MRS z otwartymi pokrywkami w komorze bezpieczeństwa biologicznego do wyschnięcia przez co najmniej 10 m
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych