Synchronizacja kultur sinic i zagęszczenie DNA napędzane przez cykle światło-ciemność
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:17 min. • October 30th, 2025
Zacznij od bogatej w składniki odżywcze płytki agarowej uzupełnionej tiosiarczanem.
Smugi cyjanobakterii i inkubuj je na przemian w okresach jasnych i ciemnych, aby utrzymać cykl okołodobowy.
W okresie świetlnym pobieranie składników odżywczych i tiosiarczan wspomaga rozwój bakterii i kondensację DNA.
W ciemnym okresie komórki oszczędzają energię i dzielą się.
Naprzemienny cykl światła i ciemności synchronizuje komórki na tym samym etapie wzrostu i podziału.
Po okresie świetlnym dodaj kilkakrotnie roztwór sacharozy i pipet, aby uwolnić sinice, powodując zmianę koloru. Przenieś komórki do probówki.
Dodaj barwnik fluorescencyjny specyficzny dla DNA i inkubuj w ciemności. Barwnik wiąże się z DNA sinicy.
Odwirować w celu oddzielenia sinic i usunięcia supernatantu.
Zawiesić cyjanobakterie w roztworze sacharozy, przenieść zawiesinę na szkiełko i przykryć.
Pod mikroskopem fluorescencyjnym niebieskie skondensowane DNA w komórkach potwierdza zsynchronizowany, regulowany przez okołodobowy postęp cyklu komórkowego sinicy.
Zacznij od hodowli sinic na dziewięciocentymetrowych, wysterylizowanych płytkach BG-11 zawierających 1,5% agaru i 0,3% tiosiarczanu sodu. Inkubuj płytki w temperaturze 23 stopni Celsj
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych