JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:54 min. • October 30th, 2025
Zacznij od hodowli cyjanobakterii, które są bakteriami fotosyntetyzującymi.
Bakterie te zawierają bogate w lipidy kropelki plastoglobul i błony tylakoidowe, które są pofałdowanymi błoniastymi strukturami bogatymi w pigmenty fotosyntetyczne.
Odwirować kulturę i wyrzucić supernatant w celu usunięcia zewnątrzkomórkowych polisacharydów wytwarzanych przez bakterie. Umyj granulkę, a następnie ponownie umieść ją w buforze.
Użyj homogenizatora wysokociśnieniowego, aby wytworzyć siłę ścinającą, która rozrywa ściany komórkowe i błony.
Pęknięcie błon tylakoidów uwalnia pigmenty fotosyntetyczne do lizatu. Uwalnianie pigmentu powoduje zmianę koloru, która wskazuje na rozerwanie komórek i uwolnienie plastoglobulki.
Załaduj lizat do probówek wirówkowych, a następnie dodaj roztwór sacharozy, aby utworzyć gradient gęstości.
Odwirować w celu oddzielenia składników komórkowych według gęstości.
Tyrakooidy i inne cięższe składniki osadzają się na dole, podczas gdy plastoglobule o niskiej gęstości unoszą się na górze jako wyraźne pasmo.
Zebrać frakcję plastoglobuli i przechowywać ją przez zamrożenie do dalszej analizy.
Hoduj 50 mililitrów kultury PCC 6802 z gatunku synechocystis w pożywce BG11 przez 7 do 10 dni,
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych