JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:15 min. • September 26th, 2025
Plastoglobule to bogate w lipidy kropelki w cytoplazmie cyjanobakterii.
Przechowują obojętne lipidy w hydrofobowym rdzeniu, otoczonym amfipatyczną monowarstwą lipidową z osadzonymi białkami strukturalnymi i enzymatycznymi. Zmagazynowane lipidy są mobilizowane podczas stresu w celu wsparcia funkcji komórkowych.
Aby je wyizolować, zacznij od surowej frakcji plastoglobuli uzyskanej z cyjanobakterii. Frakcja ta jest wzbogacona w plastoglobule i zawiera pewne szczątkowe białka zanieczyszczające.
Wymieszaj tę frakcję z gęstszym roztworem sacharozy i przenieś ją do probówki ultrawirówkowej.
Nałożyć lżejszy roztwór sacharozy, aby utworzyć nieciągły gradient gęstości.
Wirować z dużą prędkością w niskich temperaturach, aby zapobiec termicznej degradacji plastoglobul.
Gradient rozdziela składniki według gęstości: bogate w lipidy plastoglobule o niskiej gęstości unoszą się na górze, podczas gdy gęstsze, bogate w białko zanieczyszczenia toną.
Zebrać oczyszczone plastoglobule i błyskawicznie zamrozić je w pożywce zamrażającej, aby zachować ich strukturę.
Przechowywać w bardzo niskich temperaturach do długotrwałego użytkowania.
Aby zebrać czyste plastoglobule z cyjanobakterii, utwórz gradient sacharozy, j
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych