JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:22 min. • October 30th, 2025
Zacznij od wolnych od zarazków dorosłych robaków C. elegans zawieszonych w pożywce.
Wprowadzić badaną bakterię i inkubować.
Gdy robaki żerują, bakterie dostają się do światła jelita i przylegają do nabłonka.
Odwirować w celu osadzenia robaków i usunięcia niepołkniętych bakterii.
Ponownie zawiesić w buforze, odwirować i usunąć pozostałe niespożyte bakterie.
Dodać pożywkę zawierającą zabite termicznie E. coli i inkubować.
Podczas karmienia zabita termicznie E. coli wypiera i wydala nieprzylegające bakterie testowe ze światła jelita.
Odwirować i usunąć supernatant zawierający wydalone bakterie.
Przemyć buforem, odwirować i usunąć supernatant.
Schłodź robaki na lodzie, aby wywołać paraliż, zapobiegając dalszemu spożyciu.
Dodaj roztwór wybielacza i inkubuj, aby zabić resztki bakterii zewnętrznych.
Usuń wybielacz i dodaj zimny bufor.
Odwirować i usunąć supernatant, aby usunąć resztki wybielacza.
Robaki zachowują teraz tylko żywe bakterie testowe przylegające do nabłonka jelitowego, co umożliwia ilościowe określenie kolonizacji.
Rozpocznij od ponownego zawieszenia próbki robaka w jednym mililitrze M9TX-01 w probówce do mikrowirówki. Zebrać dorosłe robaki przez odwirowanie i wyrzucić supernatant. Stosuj
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych