Hodowla szybko rozwijającej się bakterii Vibrio natriegens

Weź probówkę zawierającą kulturę Vibrio natriegens, szybko rosnącej bakterii.

Odwirować kulturę, aby osadzać bakterie. Odrzucić sklarowany osad zawierający pozostałą pożywkę.

Zawiesić osad bakteryjny w świeżej pożywce i przenieść go do kolby stożkowej zawierającej tę samą pożywkę do przygotowania hodowli bakteryjnej.

Inkubuj kulturę, wstrząsając w napowietrzonych warunkach.

Ze względu na krótki czas generacji, Vibrio natriegens wykorzystuje składniki odżywcze i szybko się dzieli, aby wytworzyć skoncentrowaną populację bakterii.

Za pomocą spektrofotometru regularnie monitoruj gęstość optyczną (OD) w celu określenia stężenia bakterii.

Hoduj kulturę, aż OD osiągnie około jednego, co wskazuje na wykładniczą fazę wzrostu o wysokiej aktywności metabolicznej.

Przenieś kulturę do probówek wirówkowych.

Odwirować w niskiej temperaturze, aby oddzielić bakterie przy zachowaniu integralności komórkowej.

Umieścić probówkę na lodzie i usunąć supernatant zawierający resztki komórkowe.

Przechowuj osad bakteryjny w bardzo niskiej temperaturze do dalszej analizy.

Na początek umyj jeden mililitr nocnej kultury Vibrio natriegens , odwirowując ją w wirówce stołowej z prędkością 10 600 g przez jedną minutę.

Odessać