JoVE Encyclopedia of Experiments
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:34 min • November 28th, 2025
Zacznij od fragmentów jelit barwionych hematoksyliną i eozyną u szczurów poddanych stresowi cieplem, jeden doustnie poddany buforowi jako kontroli, a drugi zawiesinie Bacillus subtilis .
Stres cieplny uszkadza białka styków połączeń jelitowych, co skutkuje skróceniem kosmków i przerzedzeniem błony śluzowej.
Wstępne leczenie bakterią sprzyja uwalnianiu cząsteczek sygnalizujących, które stabilizują białka styku ciasnego, zachowując wysokość i grubość błony śluzowej.
Obserwuj przekroje pod mikroskopem świetlnym o wysokiej rozdzielczości, aby zidentyfikować różnice w wysokości kosmków.
Następnie umieść kroplę świeżej krwi każdego szczura na szklanych szkiełkach i przykryj foliami.
Stres cieplny destabilizuje błony erytrocytów, uwalniając mikropęcherzyki do krwiobiegu.
Bakterie te zmniejszają układowy stres oksydacyjny, stabilizując błony erytrocytów i minimalizując pęcherki.
Obserwować próbki krwi pod mikroskopem świetlnym o wysokiej rozdzielczości, aby ocenić różnice w pęcherzach.
Zachowana wysokość kosmków w części jelitowej oraz mniejsza liczba mikropęcherzyków we krwi potwierdzają ochronny wpływ bakterii pod wpływem stresu cieplnego.
Po przygotowaniu i barwieniu przekrojów jelita cienkiego zgodnie z protokołem tekstowym, użyj mikroskopu o wysokiej rozdzielczości do pomiaru kosmków jelit oraz całkowitej grubości błony śluzowej. Przeanalizuj co najmniej cztery próbki z każdego szczura i wykonaj co najmniej 20 pomiarów w każdej próbce.
Aby wykonać mikroskopię świetlną o wysokiej rozdzielczości próbek krwi, wykorzystaj platformę izolacji drgań jako bazę dla systemu mikroskopowego z kamerą wideo i komputerem do rejestrowania obrazów na żywo. Po kalibracji obrazów testowych zgodnie z protokołem tekstowym, umieść siedem mikrolitrów świeżo pobranej krwi każdego szczura na szklanym szkiełku i dodaj zaczepkę. Następnie sfotografuj i zarejestruj dziesięć klatek o wymiarach 72 na 53,3 mikrometra kwadratowego w każdej próbce.
Wreszcie, korzystając z oprogramowania umożliwiającego wysokorozdzielcze, bezpośrednie obrazy optyczne w czasie rzeczywistym, można zmierzyć stężenie pęcherzyków.