In vitro Model hodowli partiowej naśladujący fermentację kolonową przez ludzką mikrobiotę jelita
JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:12 min. • November 28th, 2025
Zacznij od rurki umieszczonej w komorze beztlenowej, która zawiera bogate w składniki odżywcze podłoże oraz wstępnie nawodniony fermentowalny błonnik.
Warunki niedotleniające wewnątrz rurki naśladują beztlenowe środowisko ludzkiego jelita grubego.
Następnie dodaj do probówki rozcieńczoną, ujednoliconą próbkę kału zawierającą drobnoustroje jelitowe i inkubuj ją.
Regularnie odwracaj rurkę, aby wymieszać mikroby z włóknem.
Podczas inkubacji mikroorganizmy beztlenowo metabolizują i fermentują błonnik, produkując krótkołańcuchowe kwasy tłuszczowe i inne metabolity, obniżając pH podłoża.
Zbieraj aliquoty z fermentującej mieszaniny w regularnych odstępach czasu, aby monitorować produkcję metabolitów i sprawdzać ich pH.
Wiruj aliquoty w niskich temperaturach, aby oddzielić biomasę mikroorganizmów w granulat.
Przenieś supernatant zawierający metabolity i krótkołańcuchowe kwasy tłuszczowe do świeżej rurki.
Zamroz zarówno biomasę mikroorganizmów, jak i supernatant w ciekłym azocie.
Na koniec przechowuj próbki w niskiej temperaturze do dalszej analizy.
Utrzymuj zaszczepione rurki w temperaturze 37 stopni Celsjusza wewnątrz komory beztlenowej i delikatnie odwracaj co godzinę, aby ponownie zawiesować włók
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych