JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:42 min. • January 30th, 2026
Zacznij od mechanicznej dysocjacji śledziony noworodków myszy, aby wygenerować zawiesinę jednokomórkową.
Przełóż zawiesie do rurki, wirówkę i usuń supernatant.
Ponownie zawiesić pellet w buforze lizy, aby wyeliminować erytrocyty.
Dodaj bufor, ponownie wiruję i usuwam supernatant.
Ponownie zawiesić komórki w buforze i inkubować za pomocą magnetycznych mikrokulek pokrytych przeciwciałami, skierowanych na receptor wyrażany na neutrofilach i zapalnych monocytach.
Wiruj i usuń rozwiązane kulki. Dodaj bufor, następnie przepuścić zawiesinę przez kolumnę ferromagnetyczną i zastosować pole magnetyczne, aby zatrzymać ogniwa związane z kulkami.
Usuń pole magnetyczne, wyluzuj komórki buforem i zasiewaj je w wielodołkowy płatek.
Do wybranych studni należy dodawać rosnące stężenia luminescencyjnych bakterii.
Inkubować, aby neutrofile i monocyty mogły internalizować bakterie przez fagocytozę.
Zamień podłoże na podłoże zawierające antybiotyki, aby wyeliminować bakterie nieinternalizowane.
Rejestruj luminescencję w regularnych odstępach czasu, aby ocenić internalizację bakterii i późniejsze zabijanie wywołane fagocytozą.
Aby wykonać test zabijania bakteryjności in vitro, umieść niezakażoną śledzionę w 40-mikr
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych