JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 1:20 min. • February 26th, 2026
Pobierz posiewy nabłonkowych komórek pęcherza moczowego w wielodołkowej płytki.
Inkubować hodowlę kontrolną dzikim typem Enterobacter cloacae, patogenną bakterią z pili, włosowatymi strukturami na powierzchni bakterii.
Podjednostka FimH pili wiąże się z receptorem komórki gospodarza, zakotwiczając bakterie typu dzikiego w komórce gospodarza.
Inkubować eksperymentalną kulturę z mutantem Enterobacter cloacae pozbawionym FimH.
Bez FimH bakterie mutantów nie przylegają do komórek gospodarza.
Po inkubacji myj buforem, aby usunąć niezwiązane bakterie.
Dodaj bufor lizy i inkubuj pod wzruszeniem, aby rozbić komórki gospodarza i uwolnić przyklejone bakterie.
Lizaty rozcieńczaj seryjnie, nakładaj je na nośnik odżywczy i inkubuj.
Lizat z hodowli kontrolnej daje kolonie, natomiast lizat z hodowli eksperymentalnej nie, co potwierdza, że FimH jest niezbędny dla adhezji bakterii do komórek gospodarza.