JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:05 min. • February 26th, 2026
Weź wielodołkową płytkę zawierającą zawiesiny bakterii niepatogennej służącej jako kontrola, oraz różne szczepy bakterii patogennych, aby ocenić ich względną zjadliwość.
Bakterie są zawieszane w podłożu o ograniczonym zawartości składników odżywczych, aby zapobiec nadmiernemu rozwojowi i naśladować środowisko sprzyjające infekcjom.
Do każdego dołka należy dodać robaki C. elegans w stopniu L4 i inkubować płytkę pod ciągłym mieszaniem, aby poprawić kontakt bakterii z robakami.
Robaki żywią się bakteriami, które dostają się do ich przewodu pokarmowego i kolonizują je.
Patogenne bakterie uwalniają toksyny, które uszkadzają tkanki jelit, prowadząc do toksyczności systemowej i ostatecznej śmierci robaków.
Po inkubacji policz żywe robaki w każdej dołce i wygeneruj wykres oceniający ich wskaźniki przeżycia.
Różnice w wskaźnikach przeżywalności robaka odzwierciedlają względną zjadliwość każdego szczepu bakterii.
Po hodowli szczepów Aeromonas i zmierzeniu ich chłonności, jak opisano wcześniej, odwiruj bulion bakteryjny w dawce 3 500 g przez 15 minut. Dostosuj bulion bakteryjny za pomocą S Medium i dodaj 195 mikrolitrów bulionu bakteryjnego do ośmiu dołków na 96-dołkowy talerz. Zmyj robaki z płyty ENGM medium M9. Następnie dostosuj stężenie roztworu robaków do pięciu robaków na mikrolitr.
Dodaj 5 mikrolitrów roztworu robaka do każdej z dołków płyty 96-dołkowej. Inkubuj talerz na shakerze i policz liczbę żywych robaków po 24, 48 i 72 godzinach.