Przetwarzanie zakażonych tkanek do enumeracji bakterii w modelu współinfekcji myszy

0 views • 3:16 min • March 31st, 2026

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Zacznij od myszy współzakażonej patogenną bakterią i wirusem.

Wirus uszkadza błonkową wyściółkę górnych dróg oddechowych myszy, ułatwiając rozprzestrzenianie się bakterii z nosowogardła do płuc.

Umieść pobrane płuca myszy w naczyniu zawierającym sól fizjologiczną z buforem fosforanowym (PBS).

Pokrój płuca na małe kawałki i dobrze wymieszaj.

Przenieś połowę tkanki płucnej do rurki zawierającej PBS.

Umieść sterylizowaną sondę homogenizatora tkanek wewnątrz rurki zawierającej tkankę płucną.

Homogenizuj tkankę, aby uwolnić bakterie do PBS.

Rozcieńcz homogenizację i nakładaj rozcieńczenia na bogatej w składniki odżywcze płytce agarowej.

Inkubuj płytkę, aby umożliwić powstanie kolonii bakteryjnych.

Policz te kolonie, aby ilościowo określić obciążenie bakteryjne płuc, co odzwierciedla obciążenie bakteryjne płuc.

Do pobierania płuc, używając nożyczek do sekcji, przetnij boki odsłoniętej klatki piersiowej i delikatnie pociągnij żebra w stronę głowy myszy, aby odsłonić serce. Do prawej komory włóż igłę o grubości 25 gauge podłączoną do strzykawki 10-mililitrowej z PBS i rozpocznij powolne przetłuszczanie. Zwracaj uwagę na wybielanie płuc jako wskaźnik skutecznej perfuzji.

Płucz powoli, aby nie przełamać tkanki płucnej. Podnieś serce kleszczami i zrób cięcie, aby oddzielić płuca od serca. Po oddzieleniu należy wyjąć wszystkie płatki płuc kleszcze i przepłuczyć w naczyniu sterylnym PBS, aby usunąć resztki krwi.

W misce Petriego pokłóń płuca na małe kawałki i dobrze wymieszaj. Usuń połowę mieszanki płucnej, aby określić bakteryjną CFU lub wirusowe PFU i umieść ją w okrągłej probówce o pojemności 15 mililitrów, wcześniej napełnionej 0,5 mililitra PBS do homogenizacji.

Aby ujednolicić zebraną tkankę, wyczyść sondę homogenizatora, dodając ją do 70% etanolu i włączając homogenizator na 60% mocy przez 30 sekund. Powtórz ten krok w sterylnej wodzie przez 10 sekund.

Ujednolicaj każdą tkankę na 1 minutę. Do wyliczania liczby bakterii, rozcieńczenia seryjne płytki na płytkach agaru krwi. Aby obliczyć całkowity CFU, użyj 10 mikrolitrów do podlewania i zanotuj końcową objętość w mililitrach dla każdej próbki. Inkubuj przez noc w temperaturze 37 stopni Celsjusza i 5% dwutlenku węgla.

06:43

Badanie społeczności drobnoustrojów in vivo: model interakcji między Candida albicans i Pseudomonas aeruginosa w drogach oddechowych za pośrednictwem gospodarza

Related Videos

0 Views

07:39

Opracowanie testu kolonizacji płuc do wizualizacji krążących komórek nowotworowych w tkankach płuc

Related Videos

0 Views

10:26

P. aeruginosa (P. aeruginosa) Zakażona kohodowla 3D komórek nabłonka oskrzeli i makrofagów na granicy faz powietrze-ciecz w celu przedklinicznej oceny środków przeciwinfekcyjnych

Related Videos

0 Views

02:42

Ilościowa ilościowa ilość obciążenia bakteryjnego tkanki w modelu myszy przewlekłej infekcji jelit

Related Videos

0 Views

02:03

Ocena obciążenia bakteryjnym śledziony myszy w badaniach infekcji

Related Videos

0 Views

03:52

Quantification of Bacterial Load in Mouse Spleen and Liver After Systemic Infection

Related Videos

0 Views

11:04

Mysi model Citrobacter rodentium: badanie udziału patogenów i gospodarza w zakaźnym zapaleniu jelita grubego

Related Videos

0 Views

12:38

Multimodalne obrazowanie 4D zakażeń Citrobacter rodentium u myszy

Related Videos

0 Views

11:40

Humanizowany model myszy do badania infekcji bakteryjnych ukierunkowanych na mikrokrążenie

Related Videos

0 Views

10:10

Eksperymentalne zakażenie Listeria monocytogenes jako model do badania odpowiedzi na interferon-γ gospodarza

Related Videos

0 Views

Last updated: 18 July 2026