JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:16 min. • March 31st, 2026
Zacznij od myszy współzakażonej patogenną bakterią i wirusem.
Wirus uszkadza błonkową wyściółkę górnych dróg oddechowych myszy, ułatwiając rozprzestrzenianie się bakterii z nosowogardła do płuc.
Umieść pobrane płuca myszy w naczyniu zawierającym sól fizjologiczną z buforem fosforanowym (PBS).
Pokrój płuca na małe kawałki i dobrze wymieszaj.
Przenieś połowę tkanki płucnej do rurki zawierającej PBS.
Umieść sterylizowaną sondę homogenizatora tkanek wewnątrz rurki zawierającej tkankę płucną.
Homogenizuj tkankę, aby uwolnić bakterie do PBS.
Rozcieńcz homogenizację i nakładaj rozcieńczenia na bogatej w składniki odżywcze płytce agarowej.
Inkubuj płytkę, aby umożliwić powstanie kolonii bakteryjnych.
Policz te kolonie, aby ilościowo określić obciążenie bakteryjne płuc, co odzwierciedla obciążenie bakteryjne płuc.
Do pobierania płuc, używając nożyczek do sekcji, przetnij boki odsłoniętej klatki piersiowej i delikatnie pociągnij żebra w stronę głowy myszy, aby odsłonić serce. Do prawej komory włóż igłę o grubości 25 gauge podłączoną do strzykawki 10-mililitrowej z PBS i rozpocznij powolne przetłuszczanie. Zwracaj uwagę na wybielanie płuc jako wskaźnik skutecznej perfuzji.
Płucz powoli, aby nie przełama
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych