JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:04 min. • February 26th, 2026
Zacznij od płyty wielodołowej zawierającej wkład powlekany kolagenem.
Dodaj medium rozprężające do otworu.
Składniki odżywcze zawarte w podłożu wspierają proliferację komórek, podczas gdy inhibitory różnicowania utrzymują stan przypominający łodygę.
Do wkładki do dołku dodaj zawiesię z klastrów komórek nabłonkowych pochodzących z hodowli komórek macierzystych jelita grubego i inkubuj.
Komórki przylegają do powierzchni pokrytej kolagenem i otrzymują składniki odżywcze zarówno z górnej, jak i dolnej komory.
Inhibitory zapobiegają różnicowaniu się komórek i ułatwiają proliferację skupisk komórek.
Za pomocą mikroskopu z kontrastem fazowym obserwuj kulturę.
Po utworzeniu monowarstwy zastąpić podłoże hodowlą świeżym medium pozbawionym inhibitorów różnicowania komórek.
Ułatwia to różnicowanie komórek w dojrzałe komórki nabłonkowe okrężnicy z ciasnymi połączeniami.
Komórki te wydzielają śluz i rozwijają funkcjonalną monowarstwę, która naśladuje fizjologiczną barierę jelitową do badań interakcji gospodarz–patogen.
Pipeta włóż 600 mikrolitrów medium rozszerzającego się do przestrzeni pod każdą wkładką. Pipeta podaj 100 mikrolitrów zawiesiny komórkowej z fiolki do każdej wkładki.
Zwróć płytkę do inkubat
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych