Ustanowienie mysiego modelu infekcji paciorkowcem grupy B pochwy

Weź hodowlę paciorkowca grupy B, czyli GBS, oportunistycznego patogena bakteryjnego.

Rozcieńcz hodowlę w świeżym podłożu i inkubuj, aby uzyskać aktywnie dzielące się bakterie.

Przenieś posiew do stożkowej rurki.

Wiruj w wirówce, aby rozpylić bakterie, a następnie wyrzuć supernatant.

Przemyj bakterie buforem.

Ponownie wiruję w wirówce, usuwam supernatant i ponownie zawiesisz bakterie w buforze.

Następnie użyj myszy poddany hormonom z nabłonkiem pochwy, bardziej podatną na infekcje.

Unieruchom mysz. Używając cienkiej końcówki pipety, wylej zawiesinę GBS do światła pochwy.

Puść mysz, podnieś jej ogon i pozwól przednim łapom chodzić po twardej powierzchni.

To sprzyja zatrzymaniu inokulum w świetle pochwy, umożliwiając przyleganie do GBS.

Sprawdź otwór pochwy pod kątem cofania się inokulum.

Przyklejone bakterie kolonizują powierzchnię nabłonka pochwy i wywołują infekcję.

Model myszy z infekcją pochwy jest gotowy do dalszych badań.

Tego samego dnia co zastrzyk hoduj pięciomililitrową, nocną płynną hodowlę szczepu GBS interesującego go w bulionie Todd Hewitt, czyli THB, w temperaturze 37 stopni Celsjusza.

Następnego ranka podhodować GBS w objętości 1 do 10 w świeżym THB przez dwie do trzy godziny inkub