Wykrywanie sacharybakterii w hodowli binarnej za pomocą reakcji łańcuchowej polimerazy

0 views • 2:06 min • February 26th, 2026

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Zacznij od hodowli Actinomyces zakażonej Saccharibacteria.

Sacharybakterie, ultramała bakteria pasożytnicza, wraz z żywicielem tworzą kulturę binarną.

Dodaj aliquot zainfekowanej kultury do rurki PCR zawierającej odczynniki wzmacniające z barwnikiem śledzącym elektroforezę oraz schorzeniami specyficznymi dla Saccharibacteria.

Umieść rurkę w termocyklerze z ustawionymi warunkami PCR.

Podczas początkowej denaturacji ciepło rozpuszcza Sacharibakterie, uwalniając genomowe DNA. Actinomyces pozostają nienaruszone dzięki sztywnym ścianom komórkowym, co ogranicza uwalnianie DNA gospodarza.

Ciepło następnie denaturuje nici DNA Saccharibacteria i aktywuje polimerazę Taq.

Podczas wyżarzania startery wiążą się z komplementarnymi sekwencjami w genomie Saccharibacteria.

W rozszerzeniu polimeraza Taq dodaje dNTP do starterów, syntetyzując nowe nici DNA.

Załaduj wzmocniony produkt PCR na żel agarozowy wstępnie barwiony barwnikiem, który wiąże się z fragmentami DNA.

Uruchom elektroforezę i zwizualizuj żel pod światłem UV.

Specyficzny dla Saccharibacteria pas amplikonu potwierdza interakcję gospodarza z pasożytem w kulturze binarnej.

Zrób 24 mikrolitry głównej mieszanki PCR do rurki PCR o pojemności 0,2 mililitra. Na jeden mikrolitr zakażonej sacharybakterią hodowlę i umieść probówkę w termocyklerze.

Ustaw program PCR zgodnie z opisem w manuskrypcie tekstowym. Załaduj i uruchom produkty PCR na żelu Agros o stężeniu 1%. Pasmo około 600 zasad potwierdzi obecność sacharybakterii.

08:58

Izolacja i identyfikacja wodnych bakterii opornych na antybiotyki oraz charakterystyka molekularna ich genów oporności na antybiotyki

Related Videos

0 Views

05:34

Wykrywanie i izolacja Campylobacter spp. z surowego mięsa

Related Videos

0 Views

05:23

Ilościowa analiza reakcji łańcuchowej polimerazy błony śluzowej żołądka w celu wykrycia Helicobacter pylori i oporności na antybiotyki

Related Videos

0 Views

13:17

Analiza mikromacierzy dla Saccharomyces cerevisiae

Related Videos

0 Views

08:30

Jednodniowy schemat przepływu pracy do wykrywania patogenów bakteryjnych i testowania oporności na środki przeciwdrobnoustrojowe na podstawie posiewów krwi

Related Videos

0 Views

13:20

Wykrywanie bakterii za pomocą fluorogennych DNAzymów

Related Videos

0 Views

02:02

Wykrywanie docelowego analitu za pomocą biosensora bakteryjnego

Related Videos

0 Views

02:05

Ustanowienie binarnej kultury sacharybakterii z bakteriami gospodarza

Related Videos

0 Views

07:32

Ustanawianie stabilnych kultur binarnych symbiotycznych bakterii sacharycznych z jamy ustnej

Related Videos

0 Views

07:55

Wykrywanie produktów pośrednich rekombinacji homologicznej poprzez ligację zbliżeniową i ilościową reakcję PCR u Saccharomyces cerevisiae

Related Videos

0 Views

Last updated: 1 August 2026