Urządzenie mikrofluidyczne do obrazowania w czasie rzeczywistym i śledzenia ciśnienia podczas tworzenia biofilmu

0 wyświetleń4:35 min • February 26th, 2026

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Zacznij od urządzenia mikrofluidycznego zamontowanego na stole mikroskopu.

Urządzenie składa się z polimerowo-szklanego zespołu otaczającego mikrokanał cylindrycznymi słupkami naśladującymi porowate ośrodek.

Pompa strzykawkowa dostarcza medium hodowlane przez strzykawkę z filtrem do kanału, który odprowadza rurę wylotową do pojemnika na odpady.

Monitoruj ciśnienie płynu bazowego za pomocą czujnika podłączonego do kanału.

Włóż rurkę wylotową do fiolki zawierającej zawiesinę bakteryjną.

Odwracaj przepływ, aż zawiesina wypełni kanał, podczas gdy filtr zapobiega przedostawaniu się bakterii do strzykawki.

Inkubuj, aby komórki bakteryjne mogły przykleić się do powierzchni, rozmnażać się i zainicjować tworzenie biofilmu.

Następnie wyjmij filtr i włóż wylot z powrotem do pojemnika na odpady.

Wznow przepływ medium i monitoruj ciśnienie, gdy biofilm rośnie i blokuje kanał.

Wykonaj mikroskopijne zdjęcia poklatkowe, aby zobrazować wzrost biofilmu w czasie. Koreluj wzrost biofilmu ze zmianami ciśnienia, aby badać biozatkanie w ośrodkach porowatych.

Zacznij od włączenia inkubatora mikroskopu trzy godziny przed eksperymentem, aby zapewnić stabilną temperaturę 25 stopni Celsjusza.

Podłącz rurkę wlotową i wylotową do urządzenia mikrofluidycznego. Zabezpiecz połączenie między rurką a strzykawką, wkładając igłę o średnicy zewnętrznej 0,6 milimetra do rurki wlotowej. Umieść urządzenie mikrofluidyczne, 30 mililitrów wody dejonizowanej i 30 mililitrów pożywki hodowlowanej w próżniowym desykatorze i odgazuj je przez co najmniej godzinę.

Po zakończeniu powoli przeciągaj podłoże hodowlane i zdejonizowaną wodę do dwóch oddzielnych strzykawek po 30 mililitrów. Następnie zamontuj urządzenie mikrofluidyczne na mikroskopie i umieść rurkę wylotową w pojemniku na odpady. Podłącz strzykawkę wypełnioną wodą dejonizowaną do kanału mikrofluidycznego przez rurkę mikrofluidyczną i powoli wstrzykuj wodę, aż wyjdzie ona z wylotu czujnika ciśnienia.

Napełnij czujnik ciśnienia wodą i przepłucz wszystkie pęcherzyki z rurki łączącej kanał mikrofluidyczny z czujnikiem ciśnienia. Zamknij wylot czujnika ciśnienia za pomocą śrub przeznaczonych do czujnika ciśnienia. Wypełnij resztę kanału mikrofluidycznego wodą dejonizowaną.

Następnie załóż filtr 1,2 mikrometra na strzykawkę do pożywki hodowlanej. Wyjmij strzykawkę z wodą i ostrożnie podłącz ją do rurki mikrofluidycznej wlotu. Po zamontowaniu strzykawki na pompie strzykawkowej przepłucz kanał podłożem hodowlowym z przepływem dwóch mililitrów na godzinę przez jedną godzinę.

Następnie ustaw pompę strzykawkową na pożądany przepływ podczas eksperymentu i ustaw odczyt ciśnienia czujników ciśnienia na zero. Następnie pipeta 1 mililitra hodowli Bacillus subtilis NCIB 3610 o gęstości optycznej 0,1 przy długości fali 600 nanometrów w fiolce wirówki o pojemności 1,5 mililitra. Aby załadować hodowlę bakterii do kanału mikrofluidycznego, umieść rurkę wylotową do fiolki wirówki i odczekaj pięć minut, aby usunąć potencjalne pęcherzyki powietrza z wylotu rurki.

Po zakończeniu należy pobrać 150 mikrolitrów roztworu bakteryjnego z przepływem 1 mililitra na godzinę, aż kanał mikrofluidyczny zostanie wypełniony kulturą bakteryjną. Następnie ostrożnie usuń filtr strzykawki z mediów hodowlanych i umieść wylot do pojemnika na odpady. Pozostawić komórki bakteryjne w warunkach zerowego przepływu w kanale mikrofluidycznym przez trzy godziny, aby umożliwić ich przyczepienie powierzchni do ośrodka porowatego.

Aby rozpocząć eksperyment, rozpocznij przepływ, ustawiając pompę strzykawkową na pożądany przepływ i rozpoczynając pomiar ciśnienia od 1 herca, zanim wykonasz zdjęcia rosnących biofilmów w pożądanym przedziale czasowym, konfiguracji optycznej i powiększeniu.

08:38

Urządzenia mikroprzepływowe do charakteryzowania procesów zdarzeń w skali porów w ośrodkach porowatych do zastosowań związanych z odzyskiwaniem oleju

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

12:32

Połączenie urządzeń fluidycznych z mikroskopią i cytometrią przepływową w celu badania transportu drobnoustrojów w ośrodkach porowatych w skalach przestrzennych

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

08:19

Narzędzia mikroprzepływowe do badania interakcji grzybowo-mikrobiologicznych na poziomie komórkowym

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

14:25

Okno na mikroświat: proste systemy mikroprzepływowe do badania transportu mikrobiologicznego w ośrodkach porowatych

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

02:53

Śledzenie wzrostu bakterii z rozdzielczością pojedynczych komórek w układzie mikrofluidowym

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

02:10

Ocena ruchliwości bakteryjnej za pomocą urządzenia mikrofluidycznego

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

14:42

Zdalne uruchamianie magnetyczne sond mikrometrycznych do mapowania 3D in situ właściwości fizycznych biofilmu bakteryjnego

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

07:19

Protokół tworzenia strumienia biofilmu w urządzeniu mikroprzepływowym z mikrofilarami

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

12:58

In Situ Mapowanie właściwości mechanicznych biofilmów za pomocą mikroreologii śledzącej cząstki

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

11:14

Wizualizacja tworzenia się biofilmu u Candida albicans za pomocą zautomatyzowanego urządzenia mikroprzepływowego

Powiązane filmy

0 Wyświetlenia

Ostatnia aktualizacja: 1 sierpnia 2026