JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:51 min. • February 26th, 2026
Zacznij od wielodołowej płytki zawierającej przylegające komórki nabłonka nowotworowego na slipie pokrywkowym.
Dodaj Shigella flexneri, patogenną bakterię.
Wiruj płytę, aby sprzyjać kontaktowi bakterii z komórkami, a następnie inkubuj.
Korzystając ze specjalistycznego systemu wydzielania, Shigella wstrzykuje białka zjadliwości komórkom nabłonkowym.
Te białka zjadliwości modulują system sygnalizacji nabłonkowej, ułatwiając pobieranie przez bakterie.
Wewnątrz komórek bakterie nadal wydzielają białka zjadliwości, które zakłócają translację komórkową i gromadzą nieprzetłumaczone mRNA.
Białka wiążące RNA i sygnalizujące łączą się z nieprzetłumaczonymi mRNA, tworząc bezbłonowe cytoplazmatyczne granulki zwane granulkami stresowymi.
Usuń podłoże i umyj, aby usunąć nieprzymocowane bakterie.
Następnie dodaj podgrzewane podłoże hodowlane wzbogacone gentamicyną, aby wyeliminować bakterie przyczepione do powierzchni.
Dodaj utrwalający, aby zachować struktury komórkowe i granulki naprężeniowe.
Usuń utrwalacz i delikatnie potrząśnij, aby usunąć pozostałości utrwalający.
Komórki są gotowe do barwienia immunofluorescencyjnego, aby zwizualizować ziarna stresu wywołane przez Shigella.
Zamień płukanie na 500 mikr
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych