JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:19 min. • March 31st, 2026
Zakażenie Streptococcus pneumoniae może powodować powstawanie mikrozmian w tkance serca.
Bakterie wewnątrz mikrozmian produkują toksyny, które hamują infiltrację komórek odpornościowych gospodarza wewnątrz mikrozmiany.
Aby zobrazować te mikrozmiany, weź uśpioną mysz zakażoną S. Pneumoniae.
Dezynfekuj okolice klatki piersiowej etanolem.
Zrób nacięcie i przeciń przeponę.
Następnie przetnij i podniósz klatkę piersiową, aby odsłonić serce.
Przetnij łączące naczynia krwionośne i wyciąć serce.
Przemyj serce buforem, aby usunąć resztki krwi.
Następnie umieść serce w kasecie do zbierania próbek tkankowych i zanurz kasetę w roztworze utrwalającym, aby utrwalić tkankę serca.
Pobierz przekrój koronny serca i wykonaj barwienie hematoksyliną i eozyną, aby zabarwić bakterie.
Pod mikroskopem zwizualizuj mikrozmianę zawierającą zabarwione bakterie.
Zbierz serce. Unieruchom unieruchomioną mysz w pozycji leżącej na platformie chirurgicznej, spryskaj klatkę piersiową 70% etanolem i osusz ją delikatnie. Za pomocą nożyczek chirurgicznych i kleszczy otwórz jamę klatki piersiowej, usuń klatkę piersiową i przeciąż przeponę, odsłaniając serce i płuca.
Następnie przetnij naczynia krwionośne połączone z sercem i użyj kleszczy, aby delikatnie usunąć serce bez powstawania siniaków. Przepłucz serce PBS i umieść je w kasecie do pobierania próbek tkanek do przecięcia koronalnego. Następnie przelej kasety do 10% buforowanego roztworu formaliny, a następnego dnia wysyłam do osadzania parafiny.
Na wczesnych etapach zmiany serca można rozpoznać po zmianie koloru, a w niektórych przypadkach także po obecności komórek odpornościowych. W zaawansowanych zmianach komórki odpornościowe są nieobecne, a w ich miejsce pojawiają się duże, naczyniowopodobne zmiany.