JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 3:02 min. • February 26th, 2026
Zacznij od preparatu zawierającego chemicznie utrwalony fragment tkanki sercowej myszy zakażonej bakterią Streptococcus pneumoniae, patogenną bakterią.
Ta infekcja powoduje powstawanie pozakomórkowych, wypełnionych bakteriami mikrozmian w mięśniach sercowych.
Przemyj ten fragment buforem, aby usunąć resztki utrwalających.
Stosuj niejonowy detergent, aby przepuścić błony komórkowe gospodarza.
Pierz ponownie, aby usunąć resztki detergentu.
Inkubuj przekroj środkiem blokującym, aby zablokować niespecyficzne miejsca wiązania.
Przepłukaj, aby usunąć niezwiązany środek blokujący.
Wprowadź pierwotne przeciwciało wiążące się z kapsularnym polisacharydem bakterii.
Przemyj, aby usunąć wszelkie niezwiązane przeciwciała, a następnie dodaj zielone przeciwciało wtórne oznaczone fluoroforem, które wiąże się z pierwotnym przeciwciałem.
Barwnik przeciwbarwnik jądrowy, aby oznaczyć jądra komórek gospodarza.
Umyj tę część i zamontuj ją za pomocą nośnika mocowania.
Obserwuj ten przekrój za pomocą mikroskopii konfokalnej, aby zobrazować oznakowane bakterie wewnątrz mikrozmian.
Używając 5-mikronowej sekcji serca na szkiełkach o dodatnio naładowanym szkiełku, najpierw zamroz te fragmenty, następnie rozmroź i pozwól
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych