JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:33 min. • February 26th, 2026
Zacznij od płytek zawierających bakterie przyczepione do powierzchni oraz planktoniczne lub swobodnie unoszące się bakterie.
Dodaj komórki ameby do obu próbek.
Na każdą próbkę umieść agarozową płatkę zawierającą Calcein-AM, barwnik przepuszczający komórki.
Usuń nadmiar płynu, pozwól wyschnąć i inkubuj płytki.
Na płytce z bakteriami przyczepionymi do powierzchni, kontakt powierzchniowy zwiększa ekspresję genów zjadliwości, wyrażając toksyny.
Toksyny te zakłócają błonę ameby i zmieniają jej kształt.
Uszkodzona błona ameba pozwala większej ilości kalceiny-AM na przedostanie się do cytoplazmy, gdzie wewnątrzkomórkowe esterazy rozszczepiają ją na fluorescencyjną kalceinę, prowadząc do jej akumulacji.
Natomiast bakterie planktonowe, które nie mają kontaktu z powierzchnią, pozostają niezjadliwe, pozostawiając błony ameb nienaruszone. To zmniejsza wejście kalceiny-AM do ameby, ograniczając nagromadzenie kalceiny fluorescencyjnej.
Zdrowe ameby również pochłaniają bakterie niezjadliwe.
Pod mikroskopem fluorescencyjnym jasne, zaokrąglone komórki ameby wskazują na zjadliwą interakcję bakteryjną, natomiast słabe, amorficzne ameby wskazują na niezjadliwe interakcje bakteryjne.
Aby ocenić zjadliwość komóre
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych