JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:03 min. • February 26th, 2026
Zacznij od śledziony myszy wcześniej zainfekowanej bakteriami patogennymi.
Umieść śledzionę w zimnej, fosforanowej soli fizjologicznej, aby zachować żywotność bakterii.
Za pomocą homogenizatora ujednolicz śledzionę, aby mechanicznie ją rozbić i uwolnić bakterie wewnątrzkomórkowe do buforu.
To generuje zawiesinę bakteryjną, która odzwierciedla całkowity obciążenie bakteriami w śledzionie.
Wykonaj seriowe rozcieńczenia homogenatu, aby zmniejszyć gęstość bakterii w roztworze i dokładnie określić liczbę bakterii.
Następnie weź płytkę agarową z odżywkami podzieloną na dwie części.
Nakładaj tę samą rozcieńczoną substancję bakteryjną na każdą część płytki agarowej, aby uzyskać repliki.
Pozwól talerzowi wyschnąć, potem odwróć go i inkubuj. Podczas inkubacji rozmnażają się żywotne bakterie i tworzą odrębne kolonie.
Policz kolonie z każdej sekcji płyty, aby obliczyć średnie jednostki tworzące kolonie, czyli CFU, które reprezentują całkowite obciążenie bakteryjne śledziony podczas infekcji.
Śledziona znajduje się w probówce o pojemności 15 mililitrów zawierającej dwa mililitry PBS. Następnie należy użyć indywidualnych, jednorazowych homogenizatorów na próbkę do maceracji tkanek na lodzie, a następnie
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych