JoVE Encyclopedia of Experiments
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 1:45 min • February 26th, 2026
Wykonaj kriosekcję tkanki z polewki, obszaru jelita grubego. Jedna część pochodzi od myszy zakażonej wyłącznie Clostridioides difficile. Druga część pochodzi od myszy współzakażonej C. difficile i Enterococcus faecalis.
W tkance współzakażonej E. faecalis metabolizuje argininę gospodarza i uwalnia ornitynę. C. difficile wchłania tę ornitinę, co sprzyja produkcji toksyn związanych ze wzrostem i uszkodzeniu tkanek.
Aby przeanalizować te próbki za pomocą obrazowania MALDI, należy nałożyć jednolitą warstwę roztworu macierzowego.
Załaduj preparaty do spektrometru mas MALDI, gdzie laser skanuje tkankę, jonizując aminokwasy przez matrycę.
Załaduj preparaty do spektrometru mas MALDI, gdzie laser skanuje tkankę, jonizując aminokwasy przez matrycę.
Powstałe jony są rozdzielane według stosunku masy do ładunku i wykrywane przez instrument, aby stworzyć przestrzenne mapy rozkładu aminokwasów.
Tkanka współzakażona wykazuje niższe poziomy argininy i wyższe stężenia ornityny niż próbka monoinfekowana, co wspiera patogenezę C. difficile napędzaną współpracą mikroorganizmów.
Wykonaj aplikację macierzy MALDI oraz spektrometrię mas MALDI, jak pokazano wcześniej.
Przeanalizuj obrazy jonów z wielu biologicznych replikacji i porównaj wyniki pod kątem istotności za pomocą porównań na wykresach intensywności za pomocą oprogramowania statystycznego SCiLS.