JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:57 min. • February 26th, 2026
Zacznij od hodowli Bacillus subtilis, bakterii glebowej, uprawianej w bogatym w składniki odżywcze.
Wirówkuj, aby rozpylić bakterie, wyrzuć supernatant, a następnie ponownie zawiesić granulek w chemicznie zdefiniowanym medium wspierającym tworzenie biofilmu.
Zmierz gęstość optyczną hodowli, aby określić odpowiednie stężenie bakterii.
Dodaj hodowlę do dołków zawierających zdefiniowane medium dla kontroli oraz zdefiniowane medium z inhibitorem do testu.
Inkubuj w warunkach statycznych. Bakterie migrują w górę i gromadzą się na granicy powietrze-ciecz, gdzie zwiększona dostępność tlenu sprzyja rozwojowi bakterii.
W studni kontrolnej bakterie na styku wydzielają składniki macierzy zewnątrzkomórkowej i tworzą unoszący się biofilm zwany pellicle, warstwę ochronną wspierającą przeżycie bakterii.
W studni testowej inhibitor zakłóca syntezę matrycy, co skutkuje rozproszeniem populacji bakteryjnych.
Ten test pokazuje, że inhibitory blokują tworzenie biofilmu, co jest kluczową cechą patogenezy bakterii.
Najpierw wybierz odpowiednią pojedynczą kolonię i przelej ją do 3 mililitrów bulionu LB. Włóż tę hodowlę do inkubatora do potrząsania na 4 godziny w temperaturze 37 stopni Celsjusza. Po inkubacji nale
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych