JoVE Encyklopedia Eksperymentów
Mikrobiologia
0 wyświetleń • 2:59 min. • March 31st, 2026
Zacznijmy od mikropłyt zawierających biofilmy patogennej bakterii, podzielonych na cztery grupy eksperymentalne.
Delikatnie aspiruj podłoże i spłuknij buforem, aby usunąć nieprzywierające komórki.
Dodaj bufor zawierający prekursor fotosensydenta do dwóch grup, podczas gdy pozostałe dwie otrzymują bufor samodzielnie.
Inkubuj wszystkie grupy w ciemności, aby prekursor mógł przeniknąć przez biofilm, wejść do komórek bakteryjnych i zostać zmetabolizowanym do fotosensyzatora, który gromadzi się w cytoplazmie i błonach.
Po inkubacji naświetl światło jedną grupę impregnowaną prekursorem i jedną grupę tylko buforową.
W grupie traktowanej prekursorem światło pobudza fotosensyzatora, który przekazuje energię tlenowi cząsteczkowemu i wytwarza reaktywne składniki tlenu (ROS).
ROS rozbijają błony, rozkładają białka i fragmentują DNA, co prowadzi do śmierci komórek bakteryjnych.
Pozostałe trzy warunki nie generują ROS, ponieważ albo prekursor, albo światło jest nieobecne, pozostawiając biofilm nienaruszony.
Aby wygenerować biofilm w płytce o pojemności 96 dołków, najpierw zainokuluj rozmrożoną Staphylococcus aureus USA w temperaturze 1 minus 80 stopni Celsjusza trzysta w trzech biofilmach, tworząc klini
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych